[发明专利]一种从紫茎泽兰植株叶片中提取杀菌活性物质的方法

说明书

本发明公开了一种从紫茎泽兰植株叶片中提取杀菌活性物质的方法，将紫茎泽兰植株叶片用乙醇回流提取得到乙醇浸膏；与硅胶混合装入层析柱，采用石油醚洗脱得到石油醚浸膏；将石油醚浸膏与硅胶混合加入到层析柱中，采用石油醚/乙酸乙酯按照不同梯度洗脱，分别得到浸膏A、B、C、D、E、F和G；浸膏B、C分别与硅胶混合加入中压制备柱中，采用正己烷/乙酸乙酯按照不同梯度洗脱，回收溶剂，分别得到杀菌活性物质B‑1、B‑2和B‑3、杀菌活性物质C‑1、C‑2和C‑3。本发明提取到的具有杀菌活性物质，能够有效防控番茄枯萎病、番茄早疫病、玉米褐斑病等植物真菌病害，使用剂量极低，实验室杀菌抑菌效果可达80％左右。

技术领域

本发明涉及植物提取物生产技术领域，特别是一种从紫茎泽兰植株叶片中 提取杀菌活性物质的方法。

背景技术

目前，我国植物病虫害防控上使用的农药，80％以上为化学制剂。鉴于化学 农药本身固有的缺点和人们不合理的长期滥用，导致病虫害产生抗药性、土壤 农药残留严重、生态环境被污染，严重危害人体健康。植物源农药具有环境相 容性好、生物活性多样、对高等动物及害虫天敌安全、有害生物不易产生抗药 性、药效较为缓和等优点，世界各国都在大力提倡使用和开发植物源绿色农药。 近20年来，我国植物源农药产业化取得了一定进展。据报道，我国现登记的 植物源农药有苦参碱、印楝素、大黄素甲醚等10多类，我国植物源农药品种之 少，产量之底，与我国巨大的农药市场需求比，简直是杯水车薪；而且现有的植物源农药生产工艺复杂，开发出的植物源杀菌剂成本高。

紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum Spreng)为菊科(Compositae)泽兰属多年生草本植物，原产于北美洲墨西哥、哥斯达黎加等地，现已广泛分布于热带、 亚热带的30多个国家和地区，是一种世界性入侵杂草。紫茎泽兰于20世纪40 年代自中缅边境进入我国云南省，现已广泛分布于我国云南、贵州、四川、重 庆、广西、西藏以及台湾等省市区。紫茎泽兰植株叶片中含有丰富的具有杀菌 活性的物质，且原材料来源极其丰富。利用紫茎泽兰植株叶片中丰富的天然活 性物质，将这些功能活性物质开发成植物源杀菌剂，应用于绿色现代农业生产， 具有重大的战略意义。

因此，亟待开发从紫茎泽兰植株叶片中提取杀菌活性物质的方法，并将杀 菌活性物质开发成植物源杀菌剂。

发明内容

本发明的目的是要解决现有技术中存在的不足，提供一种从紫茎泽兰植株 叶片中提取杀菌活性物质的方法。

为达到上述目的，本发明是按照以下技术方案实施的：

一种从紫茎泽兰植株叶片中提取杀菌活性物质的方法，包括以下步骤：

步骤一、将紫茎泽兰植株叶片阴干后，粉碎为2-5mm大小，按照料液比 1:8-1:12加入95％乙醇，80-85℃回流提取2h，回收乙醇，得到乙醇浸膏；

步骤二、按照质量比1:1-1:2将乙醇浸膏与100-200目硅胶混合均匀，装入 层析柱，采用石油醚洗脱，然后回收石油醚，得到石油醚浸膏；

步骤三、按照质量比1:1-1:1.5将石油醚浸膏与100-200目硅胶混合均匀拌 样，然后加入到预装有200-300目硅胶、径高比1:6-1:10的层析柱中，采用石油 醚/乙酸乙酯按照体积比100:0、100:1、50:1、20:1、10:1、5:1、1:1梯度洗脱， 然后回收溶剂，分别得到浸膏A、B、C、D、E、F和G；