[发明专利]一种利用CRISPRCas9技术敲除大肠杆菌中多粘菌素耐药基因mcr-1的方法在审
| 申请号： | 201811340748.0 | 申请日： | 2018-11-12 |
| 公开（公告）号： | CN109371048A | 公开（公告）日： | 2019-02-22 |
| 发明（设计）人： | 王红宁;雷昌伟;张安云;孔令汉;陈艳朋 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/90;C12N15/31;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 苗艳荣 |
| 地址： | 610065 四川省成都市武*** | 国省代码： | 四川;51 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种利用CRISPRCas9技术敲除大肠杆菌中多粘菌素耐药基因mcr‑1的方法，包括以下步骤：设计如合成sgRNA的两条引物序列SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3，退火形成双链sgRNA序列，与psgRNA‑GFP质粒进行连接，构建psgRNA‑GFPmcr‑1重组质粒，采用电转化法将CRISPR/Cas9敲除系统转化至携带mcr‑1的大肠杆菌中，敲除mcr‑1基因。本发明具有操作简便、mcr‑1基因敲除成功率高等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 敲除 大肠杆菌 多粘菌素 耐药基因 退火 电转化法 基因敲除 系统转化 引物序列 重组质粒 构建 双链 质粒 成功率 合成 携带 基因 | ||
【主权项】：
1.一种利用CRISPRCas9技术敲除大肠杆菌中多粘菌素耐药基因mcr‑1的方法，其特征在于，包括以下步骤：设计如合成sgRNA的两条引物序列SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3，退火形成双链sgRNA序列，与psgRNA‑GFP质粒进行连接，构建psgRNA‑GFPmcr‑1重组质粒，采用电转化法将CRISPR/Cas9敲除系统转化至携带mcr‑1的大肠杆菌中，敲除mcr‑1基因。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于四川大学，未经四川大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811340748.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
