[发明专利]一种晒黄烟提取物的吸附发酵制备方法和应用

摘要

本发明的目的是提供一种晒黄烟提取物的吸附发酵制备方法和应用，采用晒黄烟烟杆和甜菜根固定化吸附微生物菌株，对晒黄烟粗粉进行温育水解发酵，再结合连续逆流超声提取，制备晒黄烟叶吸附发酵提取物，该提取物具有天然烟草浓郁本香，带有水果酯香、奶香、烘烤香气，香料品质提高，纯化分离步骤简单，工艺条件温和，提取率和生产效率提高；在传统卷烟、新型加热不燃烧卷烟中加料加香应用，具有天然烟草本香，卷烟香气浓郁醇厚、浓度增加、满足感提高，带有奶香、水果酸香、烘烤香气和喉部回甜感，刺激性降低，口感改善。

主权项

1.一种晒黄烟提取物的吸附发酵制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)原料前处理：晒黄烟烟叶经粉碎机粉碎至40目～120目粉末；(2)微生物菌株的活化：将扣囊复膜孢酵母Saccharomycopsis fibuligera和食甲醇芽孢杆菌Bacillus methylotrophicus(VJ4‑1)的活性固体冻干菌粉，加入到5～10倍质量的灭菌处理的质量浓度为5～30％葡萄糖溶液中，置于35～55℃水浴锅活化30～60min，得到微生物菌株活化液，其中所述的食甲醇芽孢杆菌Bacillus methylotrophicus(VJ4‑1)保藏号为CCTCC NO：2012004，于2012年1月11日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心；(3)固定化载体制备：将晒黄烟的烟杆、甜菜根洗净烘干，处理成碎块，高压灭菌后烘干；(4)微生物菌株的固定化处理：称取上述步骤(3)灭菌烘干后的固定化载体碎块装入容器，按照碎块与活化液质量比为1:1～10加入已培养活化好的微生物菌株活化液，放置于4±0.5℃冷藏柜固定12～36h，过滤得到固定化微生物菌株的碎块；(5)晒黄烟的吸附固定化发酵：将步骤(1)所得晒黄烟烟叶粉末与5～15倍质量的水混合均匀，加入步骤(4)所述固定化微生物菌株的载体碎块，载体碎块与晒黄烟烟叶粉末质量比为1:0.5～2，在温度为35～55℃，匀速搅拌，添加乳酸调节pH值为4.0～6.0，发酵1～6d，筛网过滤去除载体碎块，微孔过滤晒黄烟粉残渣，保留晒黄烟发酵液A；(6)连续逆流超声提取：将步骤(5)所得晒黄烟粉残渣，按速率0.1～1.0kg/10min投料至浸出舱，开启主机和超声波发生器，调节温度65～100℃，料液比为质量比1:2～6，从浸出舱低端运行0.2～1h后调节出液阀门均匀放液，控制溶剂加入流量，保持浸出仓液位平衡，连续逆流超声提取达30～60min时，投料加入一定比例的醋酸铜、复合氨基酸，当连续逆流超声提取共达90～150min时，停止生产工艺，排渣，得到浸出液B；(7)将步骤(5)的发酵液A和步骤(6)的浸出液B合并，得到晒黄烟吸附发酵提取液。