[发明专利]一种由空心菜茎秆第一节间诱导再生植株的方法

摘要

本发明公开了一种由空心菜茎秆节间诱导再生植株的方法，包括选取种子灭菌后接种于生苗培养基暗培养至种子露白后，进行正常光照培养，生苗培养基为MS添加0.05％含量PPM；切取无菌苗茎秆第一节间作为外植体，接种于诱芽培养基上诱导产生不定芽，诱芽培养基为MS+1.0mg/L 6‑BA+0.1mg/L IAA；将不定芽自基部切下作为外植体，接种到生根培养基中进行生根诱导，生根培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA；待空心菜再生苗生长状况良好时，炼苗1d后，将植株移栽到含有品氏泥炭土的营养钵中培养，温度为24℃，光照强度为2500lux，光照时间为16h/d。采用茎秆第一节间作为外植体，配合特制诱芽培养基和生根培养基培养，显著提高诱芽率和生根质量，本发明构建的离体再生体系，为后续空心菜遗传转化的研究奠定了基础。

主权项

1.一种由空心菜茎秆第一节间诱导再生植株的方法，其特征在于，包括以下步骤：S101无菌苗的培育：选取饱满的空心菜种子，灭菌后接种于生苗培养基暗培养至种子露白后，进行正常光照培养，待子叶完全展开后备用，所述生苗培养基为MS基本培养基上添加0.05％含量PPM；S102不定芽的诱导待步骤S101得到的无菌苗长出茎段后，切取无菌苗茎秆第一节间作为外植体，接种于不定芽诱导的诱芽培养基上，20d后第一节间部位开始诱导产生不定芽，诱芽培养基为基本培养基MS+1.0mg/L 6‑BA+0.1mg/L IAA；S103不定芽的生根培养将步骤S102诱导得到的不定芽自基部切下作为外植体，接种到生根培养基中进行生根诱导，2d后开始生根，10d后长出健壮的根系，生根培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA；S104炼苗和移栽待空心菜再生苗生长状况良好时，在培养室内将其瓶口松开，炼苗1d后，将植株从培养基中小心取出，清水洗净根部残留的培养基，移栽到含有品氏泥炭土的营养钵中，放置于人工培养箱中，培养室温度为24℃，光照强度为2500lux，光照时间为16h/d，1周后转移到室外正常管理。