[发明专利]一种由空心菜茎秆第一节间诱导再生植株的方法有效
| 申请号: | 201811265038.6 | 申请日: | 2018-10-29 |
| 公开(公告)号: | CN109169288B | 公开(公告)日: | 2021-09-14 |
| 发明(设计)人: | 汪志伟;郝园园;舒黄英;杨壮;周燕;成善汉;朱国鹏 | 申请(专利权)人: | 海南大学 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 赵蕊红 |
| 地址: | 570228 海*** | 国省代码: | 海南;46 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 空心菜 第一 节间 诱导 再生 植株 方法 | ||
1.一种由空心菜茎秆第一节间诱导再生植株的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S101无菌苗的培育:选取饱满的空心菜种子,灭菌后接种于生苗培养基暗培养至种子露白后,进行正常光照培养,待子叶完全展开后备用,所述生苗培养基为MS基本培养基上添加0.05%含量PPM;
S102不定芽的诱导
待步骤S101得到的无菌苗长出茎段后,切取无菌苗茎秆第一节间作为外植体,第一节间上无芽点,茎秆第一节间为仅子叶节和第一片真叶节之间的部分,接种于不定芽诱导的诱芽培养基上,20d后第一节间部位开始诱导产生不定芽,诱芽培养基为基本培养基MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA,所述诱芽培养基的pH为5.8;
S103不定芽的生根培养
将步骤S102诱导得到的不定芽自基部切下作为外植体,接种到生根培养基中进行生根诱导,2d后开始生根,10d后长出健壮的根系,生根培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA,所述生根培养基的pH为5.8;
S104炼苗和移栽
待空心菜再生苗生长状况良好时,在培养室内将其瓶口松开,炼苗1d后,将植株从培养基中小心取出,清水洗净根部残留的培养基,移栽到含有品氏泥炭土的营养钵中,放置于人工培养箱中,培养室温度为24℃,光照强度为2500lux,光照时间为16h/d,1周后转移到室外正常管理,其中所述品氏泥炭土的纤维长度0-10mm。
2.根据权利要求1所述的一种由空心菜茎秆第一节间诱导再生植株的方法,其特征在于,所述步骤S101中,灭菌具体为用55℃蒸馏水浸种30min,后在超净工作台上用75%酒精浸泡30s,无菌水冲洗2次,每次2min,再用20%次氯酸钠溶液浸泡20min,无菌水冲洗6次。
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