[发明专利]一种由空心菜茎秆第一节间诱导再生植株的方法有效

专利信息
申请号: 201811265038.6 申请日: 2018-10-29
公开(公告)号: CN109169288B 公开(公告)日: 2021-09-14
发明(设计)人: 汪志伟;郝园园;舒黄英;杨壮;周燕;成善汉;朱国鹏 申请(专利权)人: 海南大学
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 代理人: 赵蕊红
地址: 570228 海*** 国省代码: 海南;46
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摘要:
搜索关键词: 一种 空心菜 第一 节间 诱导 再生 植株 方法
【权利要求书】:

1.一种由空心菜茎秆第一节间诱导再生植株的方法,其特征在于,包括以下步骤:

S101无菌苗的培育:选取饱满的空心菜种子,灭菌后接种于生苗培养基暗培养至种子露白后,进行正常光照培养,待子叶完全展开后备用,所述生苗培养基为MS基本培养基上添加0.05%含量PPM;

S102不定芽的诱导

待步骤S101得到的无菌苗长出茎段后,切取无菌苗茎秆第一节间作为外植体,第一节间上无芽点,茎秆第一节间为仅子叶节和第一片真叶节之间的部分,接种于不定芽诱导的诱芽培养基上,20d后第一节间部位开始诱导产生不定芽,诱芽培养基为基本培养基MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA,所述诱芽培养基的pH为5.8;

S103不定芽的生根培养

将步骤S102诱导得到的不定芽自基部切下作为外植体,接种到生根培养基中进行生根诱导,2d后开始生根,10d后长出健壮的根系,生根培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA,所述生根培养基的pH为5.8;

S104炼苗和移栽

待空心菜再生苗生长状况良好时,在培养室内将其瓶口松开,炼苗1d后,将植株从培养基中小心取出,清水洗净根部残留的培养基,移栽到含有品氏泥炭土的营养钵中,放置于人工培养箱中,培养室温度为24℃,光照强度为2500lux,光照时间为16h/d,1周后转移到室外正常管理,其中所述品氏泥炭土的纤维长度0-10mm。

2.根据权利要求1所述的一种由空心菜茎秆第一节间诱导再生植株的方法,其特征在于,所述步骤S101中,灭菌具体为用55℃蒸馏水浸种30min,后在超净工作台上用75%酒精浸泡30s,无菌水冲洗2次,每次2min,再用20%次氯酸钠溶液浸泡20min,无菌水冲洗6次。

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