[发明专利]利用乙酸生产L-乳酸的基因工程菌及其构建方法和应用

摘要

本发明公开了利用乙酸生产L‑乳酸的基因工程菌及其构建方法和应用。本发明公开的利用乙酸生产L‑乳酸的基因工程菌，通过对受体菌进行如下改造得到：敲除受体菌的poxB基因、pflB基因、aceEF基因、ldhA基因、lldD基因；增加受体菌中acs基因、pta基因、ackA基因、aceA基因、aceK基因、aceB基因、maeA基因、maeB基因和ldh2基因编码蛋白质的含量。本发明获得的工程菌，在摇瓶培养中利用乙酸获得的L‑乳酸产量能达到理想水平，避免了葡萄糖等碳源的使用，有助于降低L‑乳酸发酵的原料成本，具有较好的应用前景。

主权项

1.重组菌的构建方法，包括对受体菌进行下述A1‑A14的改造，得到所述重组菌；A1、敲除所述受体菌的poxB基因或抑制所述poxB基因的表达或抑制所述poxB基因编码的蛋白质的活性；A2、敲除所述受体菌的pflB基因或抑制所述pflB基因的表达或抑制所述pflB基因编码的蛋白质的活性；A3、敲除所述受体菌的aceEF基因或抑制所述aceEF基因的表达或抑制所述aceEF基因编码的蛋白质的活性；A4、敲除所述受体菌的ldhA基因或抑制所述ldhA基因的表达或抑制所述ldhA基因编码的蛋白质的活性；A5、敲除所述受体菌的lldD基因或抑制所述lldD基因的表达或抑制所述lldD基因编码的蛋白质的活性；A6、增加所述受体菌中acs基因编码蛋白质的含量或增强所述acs基因编码蛋白质的活性；A7、增加所述受体菌中pta基因编码蛋白质的含量或增强所述pta基因编码蛋白质的活性；A8、增加所述受体菌中ackA基因编码蛋白质的含量或增强所述ackA基因编码蛋白质的活性；A9、增加所述受体菌中aceA基因编码蛋白质的含量或增强所述aceA基因编码蛋白质的活性；A10、增加所述受体菌中aceK基因编码蛋白质的含量或增强所述aceK基因编码蛋白质的活性；A11、增加所述受体菌中aceB基因编码蛋白质的含量或增强所述aceB基因编码蛋白质的活性；A12、增加所述受体菌中maeA基因编码蛋白质的含量或增强所述maeA基因编码蛋白质的活性；A13、增加所述受体菌中maeB基因编码蛋白质的含量或增强所述maeB基因编码蛋白质的活性；A14、增加所述受体菌中ldh2基因编码蛋白质的含量或增强所述ldh2基因编码蛋白质的活性；所述受体菌为含有所述poxB基因、所述pflB基因、所述aceEF基因、所述ldhA基因和所述lldD基因的细菌或真菌。