[发明专利]利用乙酸生产L-乳酸的基因工程菌及其构建方法和应用

权利要求书

1.重组菌的构建方法，包括对大肠杆菌进行下述A1-A14的改造，得到所述重组菌；

A1、敲除所述大肠杆菌的poxB基因或抑制所述poxB基因的表达或抑制所述poxB基因编码的蛋白质的活性；

A2、敲除所述大肠杆菌的pflB基因或抑制所述pflB基因的表达或抑制所述pflB基因编码的蛋白质的活性；

A3、敲除所述大肠杆菌的aceEF基因或抑制所述aceEF基因的表达或抑制所述aceEF基因编码的蛋白质的活性；

A4、敲除所述大肠杆菌的ldhA基因或抑制所述ldhA基因的表达或抑制所述ldhA基因编码的蛋白质的活性；

A5、敲除所述大肠杆菌的lldD基因或抑制所述lldD基因的表达或抑制所述lldD基因编码的蛋白质的活性；

A6、增加所述大肠杆菌中acs基因编码蛋白质的含量；所述acs基因编码蛋白质为序列表中序列12所示的蛋白质；

A7、增加所述大肠杆菌中pta基因编码蛋白质的含量；所述pta基因编码蛋白质为序列表中序列14所示的蛋白质；

A8、增加所述大肠杆菌中ackA基因编码蛋白质的含量；所述ackA基因编码蛋白质为序列表中序列13所示的蛋白质；

A9、增加所述大肠杆菌中aceA基因编码蛋白质的含量；所述aceA基因编码蛋白质为序列表中序列15所示的蛋白质；

A10、增加所述大肠杆菌中aceK基因编码蛋白质的含量；所述aceK基因编码蛋白质为序列表中序列16所示的蛋白质；

A11、增加所述大肠杆菌中aceB基因编码蛋白质的含量；所述aceB基因编码蛋白质为序列表中序列17所示的蛋白质；

A12、增加所述大肠杆菌中maeA基因编码蛋白质的含量；所述maeA基因编码蛋白质为序列表中序列18所示的蛋白质；

A13、增加所述大肠杆菌中maeB基因编码蛋白质的含量；所述maeB基因编码蛋白质为序列表中序列19所示的蛋白质；

A14、增加所述大肠杆菌中ldh2基因编码蛋白质的含量；所述ldh2基因编码蛋白质为序列表中序列20所示的蛋白质；

所述大肠杆菌为含有所述poxB基因、所述pflB基因、所述aceEF基因、所述ldhA基因和所述lldD基因的大肠杆菌MG1655。