[发明专利]一种DNA-Maker的简易制备方法在审
| 申请号： | 201811209555.1 | 申请日： | 2018-10-17 |
| 公开（公告）号： | CN109355302A | 公开（公告）日： | 2019-02-19 |
| 发明（设计）人： | 欧阳乐军;李莉梅;布良灏;郭均;马铭赛;黄嘉玲;陈凯钊;孙同川;戴发 | 申请（专利权）人： | 广东石油化工学院 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/66;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) 11531 | 代理人： | 李宏伟 |
| 地址： | 525000 广东省茂*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种DNA‑Maker的简易制备方法，其步骤为：将p12S‑MK、p12F‑MK两种质粒用EcoR Ⅰ限制性内切酶进行酶切，对酶切产物进行纯化回收后，加储存液、Loading buffer混合即可。本方法稳定性高，可以确保批次之间的重复性生产，从而实现大规模生产，生产过程简单，前期载体构建好之后，后期DNA‑Maker生产成本很低，所制备的DNA‑Maker条带清晰、分布均匀并且质量稳定可长期存放。此外本发明对酶切体系及时间进行了优化，极大的提高了酶切效率，缩短了制备时间。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 酶切 简易 限制性内切酶 重复性生产 长期存放 酶切产物 酶切体系 生产过程 载体构建 质量稳定 储存液 条带 生产成本 种质 回收 清晰 优化 | ||
【主权项】：
1.一种DNA‑Maker的简易制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、构建重组质粒载体；步骤2、对重组质粒载体进行基因工程改造；步骤3、重组质粒的提取；步骤4、重组质粒质粒酶切；步骤5、酶切产物的纯化回收；步骤6、纯化回收产物与储存液、Loading buffer混合储存。
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