[发明专利]CA199定量检测试剂盒用磁微粒化学发光产品的制备方法

摘要

本发明公开了一种CA199定量检测试剂盒用磁微粒化学发光产品的制备方法：取磁珠原液加入到缓冲溶液中，混匀后，磁铁分离，弃除上清；用缓冲液分别配置二甲基氨基丙基乙基碳酰胺溶液和N~羟基丁二酰亚胺溶液，将其加入磁珠中震荡混匀，洗涤磁珠后，加入缓冲液和CA199单克隆抗体，振荡混匀；磁铁分离弃上清，加入含有氨基酸和表面活性剂的缓冲液进行后封闭、反应，磁铁分离弃去上清，加入封保液反应；磁铁分离后，将磁珠定容，2~8℃保存，磁微粒化学发光产品制备完成。本发明制备方法简单，在原有方法的基础上，在磁珠包被CA199单克隆抗体完成以后，添加氨基酸封闭的过程，使包被等磁微粒效价更高，可以实现更宽等检测范围。提高其灵敏度和磁珠分散状态。

主权项

1.一种CA199定量检测试剂盒用磁微粒化学发光产品的制备方法，其特征在于：包括下述步骤：第一步，取30μL磁珠原液加入到300μL缓冲溶液中，在振荡器上混匀5min，磁铁分离，弃除上清，重复5次；第二步，用缓冲溶液分别配置浓度10~50mg/mL的二甲基氨基丙基乙基碳酰胺溶液和浓度10~50mg/mL的N~羟基丁二酰亚胺溶液；将其加入第一步处理后的磁珠中，振荡器震荡混匀1~2h；第三步，经第二步活化后的磁珠在缓冲液中洗涤两次，操作方法同第一步；第四步，磁珠洗涤后，加入缓冲溶液和5~20μLCA199单克隆抗体，振荡器混匀反应2~3h；第五步，磁铁分离弃除上清，加入含有1~10%氨基酸、1~10%表面活性剂的缓冲液进行后封闭，在振荡器上反应20~24h；第六步，磁铁分离弃去上清，加入300~600μL封保液，振荡反应5~10min，重复4次；第七步，磁铁分离后，将磁珠定容到3~6mL的磁珠封保液中，2~8℃保存，磁微粒化学发光产品制备完成。