[发明专利]一种在液体活检中利用生物磁珠负向筛选癌细胞的方法在审
| 申请号： | 201811146561.7 | 申请日： | 2018-09-28 |
| 公开（公告）号： | CN109266612A | 公开（公告）日： | 2019-01-25 |
| 发明（设计）人： | 顾凯强;葛远龙;李国庆;杨奇飞;黄洪斌;周君 | 申请（专利权）人： | 江苏凯强医学检验有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09 |
| 代理公司： | 北京成实知识产权代理有限公司 11724 | 代理人： | 朱明福 |
| 地址： | 226300 江苏省南通市高*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种在液体活检中利用生物磁珠负向筛选癌细胞的方法，所述方法包含步骤：(a)将样本通过密度梯度离心处理样本，且样本取自癌症患者的体液，检测经处理样本，即候选样本，涉及生物检测技术领域。该在液体活检中利用生物磁珠负向筛选癌细胞的方法，利用两种能特异吸附的生物磁珠吸附出对端粒酶活性检测会产生影响的免疫细胞，使实验不会出现假阳性的结果，通过负向筛选保证其他细胞仍在样本中，使得实验不会出现假阴性的结果。 | ||
| 搜索关键词： | 样本 生物磁 负向 癌细胞 筛选 吸附 密度梯度离心 生物检测技术 酶活性检测 候选样本 免疫细胞 体液 假阳性 假阴性 对端 癌症 细胞 检测 保证 | ||
【主权项】：
1.一种在液体活检中利用生物磁珠负向筛选癌细胞的方法，所述方法包含步骤：(a)将样本通过密度梯度离心处理样本，且样本取自癌症患者的体液，检测经处理样本，即候选样本，其中密度梯度离心是通过下述步骤实现的：(i)将癌症患者的体液样本通过离心设备，离心参数为1500rpm/min，进行水平离心5min；(ii)将步骤(i)中离心后，所得样本去上清，并且加入5ml的1*PBS溶液，再加入2至3ml的淋巴细胞分离液，通过离心设备，离心参数为1600rpm/min，水平离心10min；(iii)将步骤(ii)中离心后，取所得样本的中间液面分界层液体3至4ml移至另离心管中，通过离心设备，离心参数为1500rpm/min，水平离心5min，去掉上清液，得到候选样本；(b)取得候选样本加入500ul的分离缓冲液，再加入经预洗的磁珠，并放置在四维旋转仪上进行旋转孵育，旋转过后再将候选样本放置在磁力架上，取上清转入新离心管中，通过离心设备，离心参数为1500rpm/min，水平离心5min，去掉上清液，得到标准样本；(c)将标准样本通过磁珠PCR技术去除残留的蛋白质影响，最后进行TRAP法对标准样本进行端粒酶活性检测。
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