[发明专利]用液相芯片技术检测心血管疾病药物基因多态性的特异性引物及试剂盒

摘要

本发明公开了一种用液相芯片技术同时检测15种心血管类药物相关靶基因多态性的引物组，包括15组引物，其中每组引物包括用于检测一种靶基因多态性的一对特异性扩增引物以及分别针对所述靶基因的野生型和突变型的两条ASPE引物。本发明还公开了包含这些引物组的试剂盒及其使用方法。本发明的引物组及其试剂盒可以在一步PCR反应中扩增靶序列，并联合MagPlex微球同时检测15种常见心血管类药物相关靶基因多态性，检测通量高，性价比高，一次检测可提供心血管疾病患者的用药指导，为临床合理用药提供实验室依据；本发明的试剂盒在实际应用中具有非常好的灵敏度、稳定性和准确率，与基因测序结果吻合良好，又大大降低了检测成本。

主权项

1.一种用液相芯片技术同时检测15种心血管类药物相关靶基因多态性的引物组，包括15组引物，其中每组引物包括用于检测一种靶基因多态性的一对特异性扩增引物以及分别针对所述靶基因的野生型和突变型的两条ASPE引物；所检测的靶基因多态性分别为：CYP2C9‑C430T rs1799853、CYP2C9‑A1075C rs1057910、VKORC1‑G1639A rs9923231、CYP4F2‑C1347T rs2108622、CYP2C19‑G681A rs4244285、CYP2C19‑G636A rs4986893、CYP2C19‑C806T rs12248560、PON1‑Q192R rs662、CYP2D6‑C2850T rs16947、CYP2D6‑C100T rs1065852、ADRB1‑G1165C rs1801253、ALDH2‑G504A rs671、GP1BA‑T5C rs2243093、PEAR1 G＞A rs2768759和AGTR1‑A1166C rs5186；用于检测所述靶基因多态性的引物组的序列如下所示：用于检测CYP2C9‑C430T rs1799853的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.3和序列SEQ ID NO.4所示；用于检测CYP2C9‑A1075C rs1057910的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.7和序列SEQ ID NO.8所示；用于检测VKORC1‑G1639A rs9923231的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.11和序列SEQ ID NO.12所示；用于检测CYP4F2‑C1347T rs2108622的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.15和序列SEQ ID NO.16所示；用于检测CYP2C19‑G681Ars4244285的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.19和序列SEQ ID NO.20所示；用于检测CYP2C19‑G636A rs4986893的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.23和序列SEQ ID NO.24所示；用于检测CYP2C19‑C806T rs12248560的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.25和SEQ ID NO.26所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.27和序列SEQ ID NO.28所示；用于检测PON1‑Q192R(A/G)rs662的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.29和SEQ ID NO.30所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.31和序列SEQ ID NO.32所示；用于检测CYP2D6‑C2850T rs16947的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.33和SEQ ID NO.34所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.35和序列SEQ ID NO.36所示；用于检测CYP2D6‑C100T rs1065852的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.37和SEQ ID NO.38所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.39和序列SEQ ID NO.40所示；用于检测ADRB1‑G1165C rs1801253的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.41和SEQ ID NO.42所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.43和序列SEQ ID NO.44所示；用于检测ALDH2‑G504A rs671的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.45和SEQ ID NO.46所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.47和序列SEQ ID NO.48所示；用于检测GP1BA‑T5C rs2243093的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.49和SEQ ID NO.50所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.51和序列SEQ ID NO.52所示；用于检测PEAR1 G＞A rs2768759的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.53和SEQ ID NO.54所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.55和序列SEQ ID NO.56所示；用于检测AGTR1‑A1166C rs5186的特异性扩增引物如序列SEQ ID NO.57和SEQ ID NO.58所示，其ASPE引物如序列SEQ ID NO.59和序列SEQ ID NO.60所示。