[发明专利]氨基酸脱氢酶突变体及其应用有效
申请号: | 201810942385.1 | 申请日: | 2018-08-17 |
公开(公告)号: | CN109022381B | 公开(公告)日: | 2021-03-16 |
发明(设计)人: | 洪浩;詹姆斯·盖吉;卢江平;张娜;焦学成;李瑞;张克俭;张瑜;杨益明 | 申请(专利权)人: | 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司 |
主分类号: | C12N9/06 | 分类号: | C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/04 |
代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人: | 韩建伟;金田蕴 |
地址: | 300457 天津市滨*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了氨基酸脱氢酶突变体及其应用。该氨基酸脱氢酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,突变至少包括如下突变位点之一:第64位、第94位、第133位、第137位、第148位、第168位、第173位、第183位、第191位、第207位、第229位、第248位、第255位和第282位;或者氨基酸脱氢酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点,且与发生突变的氨基酸序列具有80%以上同源性的氨基酸序列。本发明的氨基酸脱氢酶突变体具有酶活性大幅度提高的优势,其酶活相对于野生型氨基酸脱氢酶提高了大于50倍,并且酶特异性也有相应提高。 | ||
搜索关键词: | 氨基酸 脱氢酶 突变体 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种氨基酸脱氢酶突变体,其特征在于,所述氨基酸脱氢酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,所述突变至少包括如下突变位点之一:第64位、第94位、第133位、第137位、第148位、第168位、第173位、第183位、第191位、第207位、第229位、第248位、第255位和第282位,且所述第64位的赖氨酸突变为天冬氨酸;第94位的天冬氨酸突变为丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸或丝氨酸;第133位的半胱氨酸突变为丙氨酸或苏氨酸;第137位的苯丙氨酸突变为丙氨酸;第148位的苯丙氨酸突变为缬氨酸或丙氨酸;第168位的天冬酰胺突变为天冬氨酸;第173位的苏氨酸突变为丝氨酸、组氨酸、色氨酸、苯丙氨酸或亮氨酸;第183位的精氨酸突变为苯丙氨酸、赖氨酸、半胱氨酸、缬氨酸、丙氨酸或亮氨酸;第191位的脯氨酸突变为谷氨酸;第207位的酪氨酸突变为精氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸或缬氨酸;第229位的组氨酸突变为缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天冬酰胺、丝氨酸或苏氨酸;第248为的丝氨酸突变为谷氨酸;第255位的天冬酰胺突变为丙氨酸、谷氨酰胺或天冬氨酸;第282位的谷氨酰胺突变为谷氨酸;或者所述氨基酸脱氢酶突变体的氨基酸序列具有所述发生突变的氨基酸序列中的所述突变位点,且与所述发生突变的氨基酸序列具有80%以上同源性的氨基酸序列。
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