[发明专利]氨基酸脱氢酶突变体及其应用有效

专利信息
申请号: 201810942385.1 申请日: 2018-08-17
公开(公告)号: CN109022381B 公开(公告)日: 2021-03-16
发明(设计)人: 洪浩;詹姆斯·盖吉;卢江平;张娜;焦学成;李瑞;张克俭;张瑜;杨益明 申请(专利权)人: 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司
主分类号: C12N9/06 分类号: C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/04
代理公司: 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 代理人: 韩建伟;金田蕴
地址: 300457 天津市滨*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 氨基酸 脱氢酶 突变体 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种氨基酸脱氢酶突变体,其特征在于,所述氨基酸脱氢酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,所述突变为如下突变之一:第183位的精氨酸突变为苯丙氨酸、赖氨酸、半胱氨酸、缬氨酸、丙氨酸或亮氨酸。

2.根据权利要求1所述的氨基酸脱氢酶突变体,其特征在于,所述突变为如下突变位点组合之一:第183位的精氨酸突变为半胱氨酸和第229位的组氨酸突变为丝氨酸;第183位的精氨酸突变为缬氨酸和第229位的组氨酸突变为丝氨酸;第183位的精氨酸突变为亮氨酸和第229位的组氨酸突变为丙氨酸;第173位的苏氨酸突变为苯丙氨酸和第183位的精氨酸突变为半胱氨酸;第183位的精氨酸突变为半胱氨酸和第229位的组氨酸突变为亮氨酸;第183位的精氨酸突变为半胱氨酸和第207位的酪氨酸突变为精氨酸;第183位的精氨酸突变为丙氨酸和第229位的组氨酸突变为丝氨酸;第183位的精氨酸突变为缬氨酸和第229位的组氨酸突变为天冬酰胺;第183位的精氨酸突变为半胱氨酸、第229位的组氨酸突变为丝氨酸和第148位的苯丙氨酸突变为丙氨酸;第183位的精氨酸突变为半胱氨酸、第229位的组氨酸突变为丝氨酸和第207位的酪氨酸突变为精氨酸;第183位的氨酸突变为半胱氨酸、第229位的组氨酸突变为丝氨酸和第148位的苯丙氨酸突变为缬氨酸;第183位的精氨酸突变为半胱氨酸、第229位的组氨酸突变为丝氨酸和第173位的苏氨酸突变为苯丙氨酸;第183位的精氨酸突变为半胱氨酸、第229位的组氨酸突变为丝氨酸和第173位的苏氨酸突变为色氨酸;第183位的精氨酸突变为半胱氨酸、第229位的组氨酸突变为丝氨酸和第207位的酪氨酸突变为谷氨酸;第183位的精氨酸突变为丙氨酸、第229位的组氨酸突变为丝氨酸和第173位的苏氨酸突变为组氨酸;第183位的精氨酸突变为缬氨酸、第229位的组氨酸突变为丝氨酸和第173位的苏氨酸突变为组氨酸;第183位的精氨酸突变为缬氨酸、第229位的组氨酸突变为丝氨酸和第148位的苯丙氨酸突变为丙氨酸。

3.一种DNA分子,其特征在于,所述DNA分子编码权利要求1或2所述的氨基酸脱氢酶突变体。

4.一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒含有权利要求3所述的DNA分子。

5.根据权利要求4所述的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒为pET-22b(+)、pET-22b(+)、pET-3a(+)、pET-3d(+)、pET-11a(+)、pET-12a(+)、pET-14b(+)、pET-15b(+)、pET-16b(+)、pET-17b(+)、pET-19b(+)、pET-20b(+)、pET-21a(+)、pET-23a(+)、pET-23b(+)、pET-24a(+)、pET-25b(+)、pET-26b(+)、pET-27b(+)、pET-28a(+)、pET-29a(+)、pET-30a(+)、pET-31b(+)、pET-32a(+)、pET-35b(+)、pET-38b(+)、pET-39b(+)、pET-40b(+)、pET-41a(+)、pET-41b(+)、pET-42a(+)、pET-43a(+)、pET-43b(+)、pET-44a(+)、pET-49b(+)、pQE2、pQE9、pQE30、pQE31、pQE32、pQE40、pQE70、pQE80、pRSET-A、pRSET-B、pRSET-C、pGEX-5X-1、pGEX-6p-1、pGEX-6p-2、pBV220、pBV221、pBV222、pTrc99A、pTwin1、pEZZ18、pKK232-18、pUC-18或pUC-19。

6.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞含有权利要求4或5所述的重组质粒。

7.根据权利要求6所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞包括原核细胞或真核细胞。

8.根据权利要求7所述的宿主细胞,其特征在于,所述原核细胞为大肠杆菌BL21细胞或大肠杆菌DH5α感受态细胞;所述真核细胞为酵母。

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