[发明专利]免提取的用于CYP2C19基因多态性检测的试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 201810922314.5 | 申请日： | 2018-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN108998512A | 公开（公告）日： | 2018-12-14 |
| 发明（设计）人： | 郜恒骏;仁青措;沈维祥;张小燕 | 申请（专利权）人： | 上海芯超生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人： | 郑权 |
| 地址： | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开一种免提取的用于CYP2C19基因多态性检测的试剂盒所述试剂盒包括：2×PCR反应液、Oligo Mix A、Oligo Mix B、DNA聚合酶、阳性对照品和阴性对照品。本发明还公开一种免提取的检测CYP2C19基因多态性的检测方法。所述DNA聚合酶是本身或者经过基因工程改造后具有很强的抗PCR抑制剂的一种或几种DNA聚合酶。本发明的试剂盒及检测方法真正实现微量样本直接检测，免除外周血、拭子类样本的DNA提取环节。本发明中将微量的血液类样本、口腔拭子样本直接加入到PCR反应液中，运行PCR扩增程序即可完成CYP2C19基因多态性检测。整个检测过程不涉及有毒试剂，安全便捷，操作简易，整个检测耗时短，灵敏度高、特异性强、可以应用于高通量检测。 | ||
| 搜索关键词： | 试剂盒 检测 多态性检测 样本 拭子 基因工程改造 高通量检测 阳性对照品 阴性对照品 安全便捷 特异性强 微量样本 直接检测 多态性 灵敏度 外周血 抑制剂 耗时 口腔 简易 血液 环节 应用 | ||
【主权项】：
1.一种免提取的用于CYP2C19基因多态性检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：2×PCR反应液、Oligo Mix A、Oligo Mix B、DNA聚合酶、阳性对照品和阴性对照品；其中，所述Oligo Mix A含有：rs4244285G型基因正向引物，序列如SEQ ID No.1所示；rs4244285G型基因反向引物，序列如SEQ ID No.3所示；rs4986893G型基因正向引物，序列如SEQ ID No.5所示；rs4986893G型基因反向引物，序列如SEQ ID No.7所示；rs12248560C型基因正向引物，序列如SEQ ID No.9所示；rs12248560C型基因反向引物，序列如SEQ ID No.11所示；Taqman探针，序列如SEQ ID No.4、SEQ ID No.8、SEQ ID No.12、SEQ ID No.15所示；PCR上游通用引物，序列如SEQ ID No.13所示；PCR下游通用引物，序列如SEQ ID No.14所示；所述Oligo Mix B含有：rs4244285A型基因正向引物，序列如SEQ ID No.2所示；rs4244285A型基因反向引物，序列如SEQ ID No.3所示；rs4986893A型基因正向引物，序列如SEQ ID No.6所示；rs4986893A型基因反向引物，序列如SEQ ID No.7所示；rs12248560T型基因正向引物，序列如SEQ ID No.10所示；rs12248560T型基因反向引物，序列如SEQ ID No.11所示；Taqman探针，序列如SEQ ID No.4、SEQ ID No.8、SEQ ID No.12、SEQ ID No.15所示；PCR上游通用引物，序列如SEQ ID No.13所示；PCR下游通用引物，序列如SEQ ID No.14所示；所述DNA聚合酶选自Taq酶、Phusion聚合酶、Phire聚合酶、Tth聚合酶及其它们的突变体中的一种或多种。
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