[发明专利]一种污泥中蛋白质的提取方法及应用在审
申请号: | 201810855851.2 | 申请日: | 2018-07-31 |
公开(公告)号: | CN108949574A | 公开(公告)日: | 2018-12-07 |
发明(设计)人: | 王伟云;张进;臧莹;李润东 | 申请(专利权)人: | 沈阳航空航天大学 |
主分类号: | C12N1/06 | 分类号: | C12N1/06;C07K1/14;C07K1/30;C07K1/36 |
代理公司: | 沈阳维特专利商标事务所(普通合伙) 21229 | 代理人: | 陈福昌 |
地址: | 110136 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明属于固体废物处理与资源化领域,特别提供了一种污泥中蛋白质的提取方法及应用,其中,所述方法包括如下步骤:采用超声波与木瓜蛋白酶联合处理污泥,得蛋白质粗提液;采用硫酸铵沉淀法与透析袋吸附法耦合的方式纯化并浓缩蛋白质粗提液,得蛋白质精提液。该提取方法整体操作流程简单,可行性高,不引入其他物质,不影响污泥进一步的处理处置及资源化利用,得到的蛋白质精提液可以作为生产叶面肥的原料。 | ||
搜索关键词: | 蛋白质 污泥 粗提液 精提液 固体废物处理 硫酸铵沉淀法 木瓜蛋白酶 资源化利用 方式纯化 联合处理 整体操作 超声波 透析袋 吸附法 叶面肥 资源化 耦合的 应用 浓缩 引入 生产 | ||
【主权项】:
1.一种污泥中蛋白质的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:1)、采用超声波与木瓜蛋白酶联合处理污泥,得蛋白质粗提液;11)、取污泥,利用超声波破坏微生物细胞表面的细胞壁结构,其中,超声功率为150‑200W,时间为30‑50min,以污泥总悬浮固体(TSS)值为基准,每克TSS加入0.03‑0.05g木瓜蛋白酶,并放到温度为55‑65℃,转速为150‑170r/min的恒温振荡器中4‑6h进行水解,水解完成后在沸水中灭活,得处理后的污泥;12)、对处理后的污泥进行冷却,并将其在8000‑11000g的条件下离心15‑25min后弃沉淀,离心后的上清液即为蛋白质粗提液;2)、采用硫酸铵沉淀法与透析袋吸附法耦合的方式纯化并浓缩蛋白质粗提液,得蛋白质精提液;21)、向每升蛋白质粗提液中缓慢加入200‑400g硫酸铵固体,搅拌5‑7h后在2‑6℃条件下静置1h以上,之后,将静置后的液体在2‑6℃,8000‑11000g下离心10‑20min,弃掉上清液得到沉淀;22)、将步骤21)中得到的沉淀溶于蒸馏水至全部溶解后放入透析袋中,其中,所述透析袋的规格为15000‑25000Da,外部为缓冲溶液,透析24h以上,取出透析袋放到空烧杯中,在透析袋表面均匀撒上分子量与透析袋的截留分子量相同的聚乙二醇,2‑4h后得到浓缩液,即为蛋白质精提液。
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