[发明专利]一种基因多态性位点检测技术及其试剂盒

摘要

本发明提供了一种利用错配探针检测基因多态性位点的方法。在基于重组酶聚合酶扩增反应体系中,通过添加一条或两条特异性错配探针,根据探针与模板间的错配对酶切效率的影响,这一特征可通过探针上的荧光信号区分基因多态性位点，在疾病检测等领域具有重要的应用价值。所述错配探针以基因分型位点为1号位点，在探针上游（5’方向）的2‑4号位点人为引入至少一个与待检序列错配的碱基，错配位点能够增加探针在检测基因单核苷酸多态性中的特异性。本发明还提供了用于检测单核苷酸多态性的特异性探针、引物以及基于重组酶聚合酶扩增的检测试剂盒成分。

主权项

1.用于单核苷酸多态性检测的基因分型探针，探针长度为40‑52个碱基，其上连接有荧光基团、荧光淬灭基团，其特征在于该探针包含一个脱碱基修饰位点四氢呋喃（THF），该修饰位点位于荧光基团和荧光淬灭基团之间且该修饰位点位于基因分型位点下游方向（3’方向）的第一个碱基上，以基因分型位点为1号位点，在探针上游（5’方向）的2‑4号位点人为引入至少一个与待检序列错配的碱基，优选在探针上游的2号和/或3号位点引入人为错配,即分型位点上游紧邻的第一个或第二个碱基位置；探针3’端连接有封闭基团，所述封闭基团选自C3‑spacer,biotin‑TEG或phosphate。