[发明专利]陈旧血痕miRNA高通量测序文库的构建方法有效

专利信息
申请号: 201810846276.X 申请日: 2018-07-27
公开(公告)号: CN108977435B 公开(公告)日: 2022-03-22
发明(设计)人: 方晨;武会娟;严江伟;刘旭;钱嘉林;刘文丽;张小莉 申请(专利权)人: 北京市理化分析测试中心
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12Q1/6806;C40B50/06
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君;黄爽
地址: 100089 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了陈旧血痕miRNA高通量测序文库的构建方法,包括陈旧血痕样品的预处理,miRNA的提取以及miRNA测序文库构建的步骤,其中文库构建包括:①miRNA 5’和3’接头的连接;②反转录;③PCR扩增;④PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,切胶回收145‑160bp大小的片段,即得测序文库。采用本发明方法可实现在48小时内完成对陈旧血痕miRNA文库的构建,最少仅需5cm2陈旧血痕(约含10ng‑100ng RNA)样品即可。有利于对陈旧法医物证的再利用,填补了法医学领域空白,为扩展miRNA在法医学方面的应用提供有力的技术支持。
搜索关键词: 陈旧 血痕 mirna 通量 序文 构建 方法
【主权项】:
1.陈旧血痕miRNA高通量测序文库的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:A、陈旧血痕样品的预处理;B、miRNA的提取;C、miRNA测序文库的构建,步骤如下:C1、miRNA 5’和3’接头的连接;C,2、反转录;C3、PCR扩增;C4、PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,切胶回收145‑160bp大小的片段,即得测序文库。
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