[发明专利]陈旧血痕miRNA高通量测序文库的构建方法有效
申请号: | 201810846276.X | 申请日: | 2018-07-27 |
公开(公告)号: | CN108977435B | 公开(公告)日: | 2022-03-22 |
发明(设计)人: | 方晨;武会娟;严江伟;刘旭;钱嘉林;刘文丽;张小莉 | 申请(专利权)人: | 北京市理化分析测试中心 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/6806;C40B50/06 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;黄爽 |
地址: | 100089 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: |
本发明公开了陈旧血痕miRNA高通量测序文库的构建方法,包括陈旧血痕样品的预处理,miRNA的提取以及miRNA测序文库构建的步骤,其中文库构建包括:①miRNA 5’和3’接头的连接;②反转录;③PCR扩增;④PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,切胶回收145‑160bp大小的片段,即得测序文库。采用本发明方法可实现在48小时内完成对陈旧血痕miRNA文库的构建,最少仅需5cm |
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搜索关键词: | 陈旧 血痕 mirna 通量 序文 构建 方法 | ||
【主权项】:
1.陈旧血痕miRNA高通量测序文库的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:A、陈旧血痕样品的预处理;B、miRNA的提取;C、miRNA测序文库的构建,步骤如下:C1、miRNA 5’和3’接头的连接;C,2、反转录;C3、PCR扩增;C4、PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,切胶回收145‑160bp大小的片段,即得测序文库。
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