[发明专利]用于快速筛选重组菌株的重组表达载体及应用在审
| 申请号: | 201810841004.0 | 申请日: | 2018-07-27 |
| 公开(公告)号: | CN110760537A | 公开(公告)日: | 2020-02-07 |
| 发明(设计)人: | 姚斌;苏小运;高飞;罗会颖;黄火清;柏映国;王苑;涂涛;王亚茹;孟昆 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院饲料研究所 |
| 主分类号: | C12N15/80 | 分类号: | C12N15/80;C12N1/15;C12Q1/34;C12R1/885 |
| 代理公司: | 11737 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人: | 刘静荣 |
| 地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | 本发明属于农业生物技术领域,具体涉及一种用于快速筛选高表达菌株的重组表达载体和快速筛选高表达菌株的方法。本发明将一个外源的红色荧光蛋白和烟曲霉细胞表面蛋白定位信号融合表达,将该融合基因(DsRed‑AfMP1)整合到里氏木霉基因组中,从而构建里氏木霉表面展示红色荧光蛋白的菌株。将表面展示红色荧光蛋白的里氏木霉菌株通过流式细胞仪分选,可以快速分离出有益于纤维素酶活提高的基因变化。 | ||
| 搜索关键词: | 红色荧光蛋白 菌株 表面展示 快速筛选 里氏木霉 高表达 农业生物技术 细胞表面蛋白 重组表达载体 里氏木霉菌 流式细胞仪 纤维素酶活 定位信号 基因变化 快速分离 融合表达 融合基因 基因组 烟曲霉 分选 构建 外源 整合 | ||
【主权项】:
1.一种用于快速筛选高表达纤维素酶的里氏木霉的重组表达载体,其特征在于,在所述重组表达载体的基因表达盒中由上游到下游依次包括元件:cbh1启动子、红色荧光蛋白基因DsRed、细胞表面蛋白锚定信号肽基因AfMp1及cbh1终止子,其中,DsRed基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,AfMp1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。/n
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