[发明专利]用于体外细胞三维微组织形成的笼结构微孔培养皿及其制备方法

摘要

本发明公开了一种用于体外细胞三维微组织形成的笼结构微孔培养皿及其制备方法，该笼结构微孔培养皿由四个基本部分组成，第一个基本部分为底面修饰后的培养皿，第二个基本部分为修饰后的聚合物微孔阵列，第三个基本部分为细胞筛网，第四个基本部分为细胞培养基贮存池；该笼结构微孔培养皿可实现细胞接种、细胞长期培养、三维微组织形成、在线检测、多细胞三维共培养。本发明工艺简单，易于控制，成本较低。利用本发明笼结构微孔培养皿进行生物实验时，节省试剂，通量高，易于操作，进行细胞体外三维培养效率高，质量好。

主权项

1.一种用于体外细胞三维微组织形成的笼结构微孔培养皿，其特征在于，所述笼结构微孔培养皿由四个基本部分拼接组装组成：第一个基本部分为底面修饰后的培养皿(4)，即在培养皿(4)底部结合生物相容性材料薄膜层，形成培养皿(4)容器内层；第二个基本部分为修饰后的聚合物微孔阵列组件(3)，采用具有镂空微孔阵列结构的生物相容性材料薄膜，使聚合物微孔阵列组件(3)具有阵列式分布的细胞生长微孔槽，聚合物微孔阵列组件(3)外缘尺寸小于培养皿(4)容器内腔尺寸，能将聚合物微孔阵列组件(3)设置于培养皿(4)容器内的底部；第三个基本部分为细胞筛网(2)，设置于聚合物微孔阵列组件(3)上方，细胞筛网(2)对聚合物微孔阵列组件(3)的具有阵列式分布的细胞生长微孔槽形成结网式覆盖结构，细胞筛网(2)采用生物相容性材料网形的网片组件，网孔大小能满足原始待培养的细胞通过并进入聚合物微孔阵列组件(3)的具有阵列式分布的细胞生长微孔槽内，并且使在培养皿(4)容器内设置的聚合物微孔阵列组件(3)的细胞生长微孔槽内经过培养后的长大的细胞组织或细胞微团无法通过穿越细胞筛网(2)进行迁移；第四个基本部分为细胞培养基贮存池(1)，具有围堰式环形结构，作为培养皿(4)上缘的延伸增高组件，细胞培养基贮存池(1)与培养皿(4)上缘连接，使培养皿(4)容器内腔深度增加；制备了上述笼结构微孔培养皿的四个基本部分后，将它们依次封接组装成完整的笼结构微孔培养皿，然后，将笼结构微孔培养皿的表面进行修饰，修饰方法为：先将封接后的笼结构微孔培养皿整体经等离子体处理后，在紫外照射下进行灭菌处理，然后依次浸入Pluronic F‑127的水溶液、PBS缓冲溶液进行冲洗，然后向笼结构微孔培养皿中加入细胞用培养基，备用；在所述笼结构微孔培养皿中，单个细胞能通过细胞筛网(2)进入聚合物微孔阵列组件(3)具有的阵列式分布的细胞生长微孔槽，在细胞生长微孔槽中经培养形成三维微组织，形成后的三维微组织将不能再通过细胞筛网(2)，而被困于所述笼结构微孔培养皿中。