[发明专利]一种食品中大肠杆菌的检验检测方法

摘要

本发明公开了一种食品中大肠杆菌的检验检测方法，涉及食品检验检测技术领域，包括以下步骤：(1)制备样品；(2)培养试验；(3)染色试验。采用本发明对食品中的大肠杆菌进行检测，方便、快捷，成本低，灵敏度高，便于操作食品样品处理不用多次离心，不用多次膜过滤，只需离心一次，过滤一次，省时省力，就能达到现有技术多次过滤的效果。本发明提供特异性LB培养基，大肠杆菌在无氧条件下，把乳糖分解成乳酸等酸性物质，抑制除大肠杆菌以外其他细菌的生长。同时，本发明采用多个LB培养基进行对比试验，本检测方法灵敏度高，特异性好，直接根据菌落颜色就能判断出是否含有大肠杆菌，检测周期短、可操作性强、适用于处理大通量的样本、易于工业化生产。

主权项

1.一种食品中大肠杆菌的检验检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备样品：a.在无菌条件下，将样品用生理盐水溶解并进行反复清洗，然后将清洗好的样品通入到高速分散机中进行分散，加入生理盐水，充分混匀，高速分散机的转速为8500r‑9500r/min，离心35‑50s，离心后再用过滤膜进行多膜离心过滤，过滤后得滤液，将滤液分装至5个无菌试管中；b.在无菌条件下，将步骤a中的五个无菌试管内的滤液分别加入8倍质量的蒸馏水进行稀释，依次做成1：4梯度的稀释液，所述五个稀释液分别为a1、a2、a3、a4和a5；(2)培养试验：c.在无菌条件下，取出5份1mL的稀释液a1，分别移至LB培养基上培养；无氧条件下36℃培养18h；取出5份1mL的稀释液a2，分别移至LB培养基上培养；无氧条件下36℃培养18h；取出5份1mL的稀释液a3，分别移至LB培养基上培养；无氧条件下36℃培养18h；取出5份1mL的稀释液a4，分别移至LB培养基上培养；无氧条件下36℃培养18h；取出5份1mL的稀释液a5，分别移至LB培养基上培养；无氧条件下36℃培养18h；(3)染色试验：d.观察所述步骤c中的LB培养基有无气体产生，若无气体产生，则为大肠杆菌阴性；若有气体产生，则将培养基上的菌落进行革兰氏染色，同时接种在乳糖发酵管中培养，观察菌落，若乳糖发酵管中产气，革兰氏染色为阴性无芽孢杆菌，即为大肠杆菌阳性。