[发明专利]一种GII.2型诺如病毒基因组扩增引物和扩增方法有效
| 申请号： | 201810646146.1 | 申请日： | 2018-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN108796130B | 公开（公告）日： | 2021-08-17 |
| 发明（设计）人： | 薛亮;吴清平;蔡伟程;蔡淑珍;张乐;张菊梅 | 申请（专利权）人： | 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心）;广东环凯微生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6869;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星 |
| 地址： | 510070 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种GII.2型诺如病毒基因组的扩增引物和扩增方法。本发明基于GII.2型诺如病毒基因组所包含的三个开放阅读框，采用了“4+1+1”的分段扩增策略，在保守区域设计了六组扩增引物和两条基因组末端测序引物，以目标病毒RNA为模板进行RT‑PCR扩增与测序，再通过拼接比对，获得GII.2型诺如病毒基因组序列。将该扩增方法应用于实际检出样本，成功获得我国来源的GII.2型诺如病毒基因组序列。本发明方法具有操作简单、周期短、易推广等优点，可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等具有诺如病毒检测需求及相应的科研领域。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 gii 型诺如 病毒 基因组 扩增 引物 方法 | ||
【主权项】：
1.一种GII.2型诺如病毒基因组扩增引物，其特征在于，包括六对扩增引物和两条基因组末端的测序引物：引物对1：II‑1F：5'‑GTGAATGAAGATGGCGTCTAAC‑3'；II.2‑1R：5'‑GTCAACTCCATTCCGTGGGA‑3'；引物对2：II.2‑2F：5'‑AGCCTACATGAAGACCTTGGAC‑3'；II.2‑2R：5'‑GCTCTTTCTTCCTTGCGTTG‑3'；引物对3：II.2‑3F：5'‑CACGGCATTCTCAAGCAAAG‑3'；II.2‑3R：5'‑TCGTCCATCAAACCGCCAAA‑3'；引物对4：II.2‑4F：5'‑GAGCACTGGAATGGGGAATC‑3'；II‑4R：5'‑CCRCCNGCATRHCCRTTRTACAT‑3'；引物对5：II‑5F：5'‑GGAGGGCGATCGCAATC‑3'；II‑5R：5'‑CCRGCRAAGAAAGCTCCAGCCAT‑3'；引物对6：II.2‑6F：5'‑AAATTCACCCCAGTTGGAC‑3'；II.2‑6R：5'‑TCACTAAGCTTGTGACTCC‑3'；测序引物：II.2‑seq1R：5'‑GCCCTCTTTCCACATACAGTCC‑3'；II.2‑seq6F：5'‑TGAATGCGCCCATGACACAG‑3'；R代表A/G，H代表A/C/T，N代表碱基A/C/T/G。
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