[发明专利]一种GI.Pb/GI.6重组型诺如病毒基因组扩增引物和扩增方法有效
| 申请号： | 201810646126.4 | 申请日： | 2018-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN108796129B | 公开（公告）日： | 2021-09-03 |
| 发明（设计）人： | 薛亮;吴清平;张乐;蔡伟程;蔡淑珍;张菊梅 | 申请（专利权）人： | 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心）;广东环凯微生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6869;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星 |
| 地址： | 510070 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种GI.Pb/GI.6重组型诺如病毒基因组扩增引物和扩增方法。本发明基于GI.Pb/GI.6重组型诺如病毒基因组所包含的三个开放阅读框，采用了“4+1+1”的分段扩增策略，在保守区域设计了六对扩增引物和两条基因组两端的测序引物，以目标病毒RNA为模板进行RT‑PCR扩增与测序，再通过拼接比对，获得GI.Pb/GI.6型诺如病毒基因组序列。利用该引物对GI.Pb/GI.6重组型诺如病毒基因组进行扩增和测序的方法具有操作简单、周期短、成本低、灵敏度高等特点。本发明可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等具有诺如病毒检测需求的机构以及相应的科学研究领域。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 gi pb 重组 型诺如 病毒 基因组 扩增 引物 方法 | ||
【主权项】：
1.一种GI.Pb/GI.6重组型诺如病毒基因组扩增引物，其特征在于，包括六对扩增引物和两条测序引物：引物对1：I‑1F：5'‑GTGAATGATGATGGCGTC‑3'；I.b‑1R：5'‑GCAGAGAGTTTTCTAGCTTT‑3'；引物对2：I.b‑2F：5'‑TAGCCATTGGATTTACCAG‑3'；I.b‑2R：5'‑CTCAGTCTCACATAGTCCA‑3'；引物对3：I.b‑3F：5'‑AAGAACACAAGTGCAAAGTCC‑3'；I.b‑3R：5'‑GACATGCATCACTGTAACTCCA‑3'；引物对4：I.b‑4F：5'‑AAGCCATTTGCTGAGCCAC‑3'；G1SKR：5'‑CCAACCCARCCATTRTACA‑3'；引物对5：G1SKF：5'‑CTGCCCGAATTYGTAAATGA‑3'；I.6‑5R：5'‑CATTATATACGCCGCAATCC‑3'；引物对6：I.6‑6F：5'‑CGACATCATAGGTAGCCTT‑3'；I.6‑6R：5'‑AAATCTGAATATGGTGCCCAC‑3'；测序引物：I.b‑seq1R：5'‑GCTGGTTCCATATTCCTTAGGTC‑3'；I.6‑seq6F：5'‑GGTCTCCAGGCTCAACGGTA‑3'；R代表A/G，Y代表C/T。
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