[发明专利]一种苏云金芽孢杆菌以色列亚种毒素蛋白的定量检测方法有效
| 申请号： | 201810644284.6 | 申请日： | 2018-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN108872350B | 公开（公告）日： | 2020-12-04 |
| 发明（设计）人： | 胡凌云;金海燕;刘荷梅;刘华梅 | 申请（专利权）人： | 武汉科诺生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人： | 徐绍新 |
| 地址： | 430074 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌以色列亚种毒素蛋白的定量检测方法，它是在现有苏云金芽胞杆菌毒素蛋白含量测定方法的基础上，通过采用特殊的样品预处理方法，解决了试样中杂质干扰毒素蛋白定量检测的问题，同时对SDS–PAGE凝胶配方进行了优化，进一步改善了凝胶电泳图谱中两种蛋白带的迁移率、分辨率和蛋白带形态，使测得的结果更加准确。本发明能用于Bti类产品的质量控制，具有操作简单易行、快速、成本低、受外界环境影响小等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 苏云金 芽孢 杆菌 以色列 毒素 蛋白 定量 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种苏云金芽孢杆菌以色列亚种毒素蛋白的定量检测方法，其特征在于包括以下步骤：1)取苏云金芽孢杆菌以色列亚种待测样品，加入pH为7‑9、浓度为0.05‑0.2mol/L的磷酸缓冲液，充分混匀后离心，弃去上清，再加入水，充分混匀后离心，弃去上清；2)向收集到的菌泥中加水，充分悬浮，然后再加入氢氧化钠溶液使氢氧化钠终浓度达0.1mol/L，摇匀，静置后再加入样品稀释液，于沸水浴中加热5‑10min，冷却后离心，取上清，配制成样品溶液；3)配制SDS‑PAGE，加入样品溶液，进行凝胶电泳操作；4)电泳后的胶片经固定、染色、漂洗、脱色、成像，根据蛋白带区域的强度值计算含量。
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