[发明专利]一种对鲑鳟鱼胚胎进行倍性鉴定的方法

摘要

一种对鲑鳟鱼胚胎进行倍性鉴定的方法，它涉及一种对鱼胚胎进行倍性鉴定的方法。本发明方法能够缩短倍性鉴定周期，避免养殖过程中外界因素导致的生产损失。鉴定方法：一、将鲑鳟鱼胚胎用固定液固定；二、制胚胎细胞悬浊液；三、用细胞核染液将切除头部及其它可辨识胚胎组织后的剩余胚胎细胞冲洗至步骤二胚胎细胞悬浊液中，过滤，获得检测样本；四、已知鲑鳟鱼二倍体样本用倍性分析仪检测，并调整荧光信号值至100处设定为对照样本；将检测样本染色后用倍性分析仪检测，记录荧光信号值，通过机器自带的分析系统，将检测样本的峰值图均值与对照样本峰值图比较，确定检测样本的倍性大小。

主权项

1.一种对鲑鳟鱼胚胎进行倍性鉴定的方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：一、将鲑鳟鱼胚胎用固定液固定；二、将鲑鳟鱼眼点期胚胎从固定液中取出，放入PBS缓冲液中浸泡洗去表面的固定剂，随后取出用刀片将卵切开去除卵皮，再用刀片切取胚胎头部及其它可辨识胚胎组织，置于新培养皿的细胞核染液中，然后切碎、摇匀制成胚胎细胞悬浊液；三、用细胞核染液将切除头部及其它可辨识胚胎组织后的剩余胚胎细胞冲洗至步骤二胚胎细胞悬浊液中，再用30μm孔径滤网对胚胎细胞悬浊液进行过滤；取滤液用30μm孔径滤网再过滤一次，获得检测样本；四、将染色的已知鲑鳟鱼二倍体样本用倍性分析仪检测，并调整荧光信号值至100处设定为对照样本；将检测样本染色后用倍性分析仪检测，记录荧光信号值，通过机器自带的分析系统，将检测样本的峰值图均值与对照样本峰值图比较，确定检测样本的倍性大小；其中，步骤一中固定液按以下步骤制成，100ml PBS缓冲液中加入4g多聚甲醛，然后加入2～5滴NaOH并维持温度于60℃±2℃磁力搅拌直至多聚甲醛溶解，之后冷却至室温并调整pH值为7.4。