[发明专利]以花茎为外植体的玉露离体快繁方法

摘要

本发明公开了一种以花茎为外植体的玉露离体快繁方法，本方法以玉露花茎为外植体，外植体经酒精、氯化汞、次氯酸钠消毒以后接种于愈伤组织诱导培养基，获得愈伤组织；愈伤组织转接至分化培养基后得到不定芽，选择株高大于1.5cm的不定芽瓶外生根培养，对于株高不大于1.5cm的，转接到状苗培养基进行壮苗，壮苗结束后进行瓶外生根培养。本发明解决了现有玉露繁殖效率低下等问题，操作较为简单，适合于玉露的规模化生产。

主权项

1.以花径为外植体的玉露离体快繁方法，其特征在于包括步骤：S1，外植体消毒：取玉露植株幼嫩花径的上部或中上部，于无菌环境，先用75％(体积/体积)酒精浸泡消毒30s，再用0.1％(质量/体积)的HgCl2溶液浸泡消毒7min,最后用2％(质量/体积)的次氯酸钠溶液浸泡消毒4min，每次浸泡消毒结束，均用无菌水洗涤；得到无菌外植体；S2，愈伤组织诱导：将无菌外植体切成0.5cm的小段，接种在愈伤组织诱导培养基上，于黑暗、温度22‑25℃条件下进行培养；所述愈伤组织诱导培养基以MS培养基为基础培养基，在每升培养基里面加0.2mgα‑萘乙酸、1.5mg6‑苄基氨基腺嘌呤、30g蔗糖、调pH至5.8；S3，愈伤组织的分化：将愈伤组织切成小块后，转接到分化培养基，于温度22‑25℃条件下培养30～45天，分化出不定芽；所述分化培养基以MS培养基为基础培养基，在每升培养基里面加0.5mg/L6‑苄基氨基腺嘌呤、0.4mg/Lα‑萘乙酸、0.4mg/L激动素、30g蔗糖，调pH至5.8；S4，瓶外生根：选择株高大于1.5cm的不定芽，于室温下打开瓶口炼苗2～4天后，取出不定芽用自来水冲去其基部的基质和其它杂质，在浓度为150mg/L的α‑萘乙酸中速蘸，然后将不定芽移栽至移植基质内。