[发明专利]以花茎为外植体的玉露离体快繁方法在审
| 申请号： | 201810628104.5 | 申请日： | 2018-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN108739395A | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 张青华;许彬;张应华;王薇;许春城 | 申请（专利权）人： | 云南农业大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 650201 云南*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 玉露 外植体 花茎 离体快繁 生根培养 愈伤组织 壮苗 不定芽 愈伤组织诱导培养基 分化培养基 规模化生产 次氯酸钠 培养基 转接 氯化汞 接种 酒精 消毒 繁殖 | ||
1.以花径为外植体的玉露离体快繁方法，其特征在于包括步骤：
S1，外植体消毒：取玉露植株幼嫩花径的上部或中上部，于无菌环境，先用75％(体积/体积)酒精浸泡消毒30s，再用0.1％(质量/体积)的HgCl2溶液浸泡消毒7min,最后用2％(质量/体积)的次氯酸钠溶液浸泡消毒4min，每次浸泡消毒结束，均用无菌水洗涤；得到无菌外植体；
S2，愈伤组织诱导：将无菌外植体切成0.5cm的小段，接种在愈伤组织诱导培养基上，于黑暗、温度22-25℃条件下进行培养；所述愈伤组织诱导培养基以MS培养基为基础培养基，在每升培养基里面加0.2mgα-萘乙酸、1.5mg6-苄基氨基腺嘌呤、30g蔗糖、调pH至5.8；
S3，愈伤组织的分化：将愈伤组织切成小块后，转接到分化培养基，于温度22-25℃条件下培养30～45天，分化出不定芽；所述分化培养基以MS培养基为基础培养基，在每升培养基里面加0.5mg/L6-苄基氨基腺嘌呤、0.4mg/Lα-萘乙酸、0.4mg/L激动素、30g蔗糖，调pH至5.8；
S4，瓶外生根：选择株高大于1.5cm的不定芽，于室温下打开瓶口炼苗2～4天后，取出不定芽用自来水冲去其基部的基质和其它杂质，在浓度为150mg/L的α-萘乙酸中速蘸，然后将不定芽移栽至移植基质内。
2.根据权利要求1所述的以花径为外植体的玉露离体快繁方法，其特征在于：在S4步骤中，将株高不大于的1.5cm的不定芽转接到壮苗培养基，在温度22-25℃条件下进行壮苗培养，壮苗结束后，重复S4步骤进行移栽；所述壮苗培养基以1/2MS培养基为基础培养基，在每升培养基内加入1mgα-萘乙酸、0.5mg吲哚丁酸、30g蔗糖，调pH至5.8。
3.根据权利要求1所述的以花径为外植体的玉露离体快繁方法，其特征在于：S4步骤中，S4步骤中，所述移植基质为蛭石、椰砖、珍珠岩质量比1:3:1的混合物，含水40-50％。
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