[发明专利]一种检测全基因组的单链DNA损伤的方法有效
| 申请号： | 201810561048.8 | 申请日： | 2018-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN108753939B | 公开（公告）日： | 2021-08-03 |
| 发明（设计）人： | 菲利普·卡帕诺夫;曹慧芬;英格丽·劳伦娜·萨拉·加西亚 | 申请（专利权）人： | 华侨大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人： | 张松亭;游学明 |
| 地址： | 362000 福建省*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测全基因组范围的单链DNA损伤的综合性方法。其包括1)使用交联剂进行交联以捕获内源性的单链断裂；2)把染色质碎片化；3)经过核酸酶灭活后，细胞核进一步进行蛋白酶K处理以及交联逆转，分离获得基因组DNA；4)对纯化后的核酸片段进行加尾等步骤。本发明的检测精度至核酸水平。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 基因组 dna 损伤 方法 | ||
【主权项】：
1.一种检测全基因组的单链DNA损伤的方法，它包括如下步骤：1)使用交联剂进行交联以捕获内源性的单链断裂；2)把染色质碎片化，使3’‑OH缺失的片段无法用TdT加尾；3)经过核酸酶灭活后，细胞核进一步进行蛋白酶K处理以及交联逆转，分离获得基因组DNA；4)对纯化后的核酸片段进行加尾，加尾后的基因组DNA直接用于SMS；采用三代测序仪平台测序，获得单链DNA损伤位点。
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