[发明专利]一种利用细菌纤维素压电水凝胶诱导干细胞分化的方法

摘要

本发明公开了一种利用细菌纤维素压电水凝胶诱导干细胞分化的方法，具体步骤如下：将片状细菌纤维素水凝胶用SDS去离子水溶液处理，再用NaOH去离子水溶液处理，然后用去离子水充分浸泡清洗；将片状细菌纤维素水凝胶小片放置于孔板中；将培养在细胞培养瓶中的干细胞进行消化后用细胞培养基分散得到干细胞悬液，接种在孔板中的片状细菌纤维素水凝胶表面，培养1天～90天后，检测细胞内与神经分化相关的特异性蛋白和基因的含量及表达水平。本发明首次发现并公开了用细菌纤维素压电水凝胶诱导干细胞向神经或胶质细胞分化的方法，并通过试验证明片状细菌纤维素水凝胶诱导干细胞向神经或胶质细胞分化效果良好。

主权项

1.一种利用细菌纤维素压电水凝胶诱导干细胞分化的方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)将片状细菌纤维素水凝胶用1％～10％的SDS去离子水溶液在30℃～180℃下处理1h～24h，并在1％～10％的NaOH去离子水溶液中于40℃～160℃下处理1h～8h；然后用去离子水充分浸泡清洗，将清洗后的片状细菌纤维素水凝胶剪成0.5×0.5cm2～2×2cm2的小片备用；(2)将片状细菌纤维素水凝胶小片放置于孔板中，加入75％酒精并在其中浸泡12h～48h，同时在无菌操作台中用紫外灯照射30min～180min进行灭菌消毒，用PBS将片状细菌纤维素水凝胶小片上的酒精洗净备用；(3)将培养在细胞培养瓶中的干细胞进行消化后用细胞培养基分散得到干细胞悬液，将体积为0.01ml～5ml，细胞个数为2×103～1×106个的细胞悬液接种在孔板中的片状细菌纤维素水凝胶表面，静置10min～120min后，在孔板中补充0ml～5mL细胞培养基，将干细胞在片状细菌纤维素水凝胶衬底上培养，每天超声处理0min～60min，且每2天更换一次细胞培养基；(4)培养1天～90天后，检测细胞内与神经分化相关的特异性蛋白和基因的含量及表达水平。