[发明专利]一种利用马来甜龙竹芽尖进行高效稳定再生体系的建立方法

摘要

一种利用马来甜龙竹芽尖进行高效稳定再生体系的建立方法，属于植物组织培养技术领域。其按下列步骤进行：1）无菌芽的获得；2）愈伤组织诱导培养；3）愈伤组织分化培养；4）再生苗生根培养；5）再生植株的移栽。采用本方法最高愈伤组织诱导率为91.7%，其中乳白色致密颗粒状愈伤组织诱导率为61.7%，最高幼苗分化率为46.67%，最高生根率为55%；能够使外植体高效诱导出愈伤组织，成功建立高效稳定的再生体系，为该竹子遗传转化和细胞工程研究创造有利条件，为利用转基因技术育种奠定了良好的基础。本方法实施步骤简单易行，实施条件宽松，效果非常显著。

主权项

1.一种利用马来甜龙竹芽尖进行高效稳定再生体系的建立方法，其特征在于按下列步骤进行：1）无菌芽的获得将马来甜龙竹种子剥去外壳置于烧杯中，浸泡24 h，0.5%次氯酸钠溶液真空抽滤20 min，无菌水冲洗干净后在体式显微镜下剥离种胚，将其接种到MS培养基中，待苗长大后移至芽增殖培养基进行培养，得到马来甜龙竹无菌苗体系；2）愈伤组织诱导培养取步骤1）得到的马来甜龙竹无菌苗体系，将0.5 cm长的带芽茎段接种于诱导培养基中进行诱导培养，得到愈伤组织；3）愈伤组织分化培养取经过增殖培养的乳白色、致密颗粒状愈伤组织接种至分化培养基中进行分化培养，得到再生苗；4）再生苗生根培养将步骤3）得到的再生苗移入生根培养基中进行生根诱导培养；5）再生植株的移栽生根诱导培养后，选取根长势粗壮且植株健壮的再生苗进行驯化移栽，将其放在驯化室下炼苗，炼苗后进行移栽培养。