[发明专利]人蛋白基因Notch3胞内片段克隆载体及其制备方法和应用在审

专利信息
申请号: 201810371944.8 申请日: 2018-04-24
公开(公告)号: CN108546707A 公开(公告)日: 2018-09-18
发明(设计)人: 梁健嘉;聂秋苗;唐巧燕;何新柳;刘丕琼;陈春裕 申请(专利权)人: 南宁维尔凯生物科技有限公司
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N15/66;C07K14/705
代理公司: 广西南宁公平知识产权代理有限公司 45104 代理人: 杨立华
地址: 530000 广西壮族自治*** 国省代码: 广西;45
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摘要: 发明公开了一种人蛋白基因Notch3胞内片段克隆载体,在pcDNA3.1载体的KpnI和XbaI酶切位点之间构建有人蛋白基因Notch3胞内片段序列。据此,还建立了相应构建方法。实验结果显示,使用该测序验证后的过表达质粒转染的细胞经qPCR检测和蛋白质免疫印迹检测,均可在细胞中特异性高表达N3ICD的mRNA及蛋白,测定结果清晰准确,价格低廉,大幅缩减实验成本。因此,本发明构建的N3ICD过表达载体可以作为现成的亚克隆模板,参与到过表达载体构建和过表达慢病毒包装中,为心肌系统疾病的研究带来巨大便利。本发明有效解决了人源N3ICD片段克隆困难和在细胞系中高表达的问题,为Notch3基因通路研究提供了实验基础。
搜索关键词: 构建 片段克隆 表达载体 高表达 人蛋白 蛋白质免疫印迹检测 制备方法和应用 细胞 表达质粒 蛋白基因 基因通路 片段序列 实验成本 实验基础 系统疾病 有效解决 慢病毒 亚克隆 基因 测序 人源 位点 转染 心肌 蛋白 验证 研究 便利 检测 清晰
【主权项】:
1.一种人蛋白基因NOTCH3胞内片段克隆载体,其特征在于:在pcDNA3.1载体的KpnI和XbaI酶切位点之间构建有人蛋白基因NOTCH3胞内片段序列。
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