[发明专利]蹄甲多肽的制备方法有效
| 申请号: | 201810306987.8 | 申请日: | 2018-04-08 |
| 公开(公告)号: | CN108504711B | 公开(公告)日: | 2021-09-10 |
| 发明(设计)人: | 张春颖 | 申请(专利权)人: | 山东鲁北药业有限公司 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34 |
| 代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 史霞 |
| 地址: | 256800 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种蹄甲多肽的制备方法,包括:步骤一、原料前处理:采用淀粉溶液处理,淀粉溶液为:将玉米淀粉、面粉、苏打、玉米油、香葱粉、以及水混合,并于70℃水浴条件下搅拌20min,搅拌速度为1000转/min;步骤二、采用生姜蛋白酶溶液、乙醇、以及角蛋白酶进行第一次酶解;步骤三、采用无花果蛋白酶、猕猴桃蛋白酶、以及菠萝蛋白酶在加载电流的条件下进行第二次酶解,其中,电流装置包括一对中空的圆柱形的电极罩,电极罩底部敞开、顶部连接有导线,一对电极罩上的导线分别与正电源和负电源连接;步骤四、过滤、干燥即可。本发明具有提高蹄甲多肽得率和相对分子质量为10000~3500的蛋白质或多肽的比例的有益效果。 | ||
| 搜索关键词: | 多肽 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.蹄甲多肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤,以下原料按重量份数计:步骤一、原料前处理:将蹄甲置于淀粉溶液中浸泡2h,然后将蹄甲和淀粉溶液一起依次置于45℃水浴条件下搅拌30min,置于零下10℃条件下冷冻30min,进行超声处理,超声处理条件为80KHz频率、60℃、15min,然后取出蹄甲用纯水冲洗干净;其中,淀粉溶液的配制方法为:将10份玉米淀粉、2份面粉、1份苏打、0.5份玉米油、0.5份香葱粉、以及50份水混合,并于70℃水浴条件下搅拌20min,搅拌速度为1000转/min,即得淀粉溶液;步骤二、第一次酶解:将100份步骤一处理后的蹄甲置于70℃条件下热风干燥50min,然后粉碎至粒径小于25μm,将蹄甲粉末与100份生姜蛋白酶溶液混合均匀,于60℃水浴条件下静置0.5h,加入0.7份乙醇,继续于60℃水浴条件下静置1h,然后于70℃水浴条件下静置10min,冷却至45℃以下后,调节PH值至9,再加入0.3份角蛋白酶,置于45℃水浴条件下搅拌1.5h,再加入0.2份乙醇,继续于45℃水浴条件下静置2h,然后于70℃水浴条件下静置10min,过滤取蹄甲滤液;其中,生姜蛋白酶溶液的制备方法为:将100份纯水、5份生姜蛋白酶、5份卵磷脂、以及1份维生素B混合均匀,即得生姜蛋白酶溶液;步骤三、第二次酶解:待步骤三中的蹄甲滤液冷却至65℃以下后,调节PH值至5.5,然后向混合液中加载电流,加入0.2份无花果蛋白酶,置于65℃水浴条件下搅拌1h,加入0.1份猕猴桃蛋白酶,继续于65℃水浴条件下搅拌1.5h,再于100℃水浴条件下静置10min,停止向混合液中加载电流,冷却至30℃以下后,调节PH值至7,再向混合液中加载电流,加入0.15份菠萝蛋白酶,于30℃水浴条件下搅拌3h,再于70℃水浴条件下静置10min,再于78℃水浴条件下搅拌4h,再停止向混合液中加载电流;其中,上述加载电流的具体方法为采用电流装置进行加载,所述电流装置包括一对中空的圆柱形的电极罩,所述电极罩底部敞开、顶部连接有导线,一对电极罩上的导线分别与正电源和负电源连接,所述电极罩底部敷设绝缘环,所述电极罩侧壁靠下部位套设有环形的重力块,所述重力块由绝缘材料制成,所述正电源和所述负电源之间的电压为36V,所述电极罩的直径为10cm;步骤四、将步骤三处理后得到的混合液过滤取蹄甲酶解液,干燥后即得蹄甲多肽粉末。
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