[发明专利]蹄甲多肽的制备方法有效
| 申请号: | 201810306987.8 | 申请日: | 2018-04-08 |
| 公开(公告)号: | CN108504711B | 公开(公告)日: | 2021-09-10 |
| 发明(设计)人: | 张春颖 | 申请(专利权)人: | 山东鲁北药业有限公司 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34 |
| 代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 史霞 |
| 地址: | 256800 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 多肽 制备 方法 | ||
本发明公开了一种蹄甲多肽的制备方法,包括:步骤一、原料前处理:采用淀粉溶液处理,淀粉溶液为:将玉米淀粉、面粉、苏打、玉米油、香葱粉、以及水混合,并于70℃水浴条件下搅拌20min,搅拌速度为1000转/min;步骤二、采用生姜蛋白酶溶液、乙醇、以及角蛋白酶进行第一次酶解;步骤三、采用无花果蛋白酶、猕猴桃蛋白酶、以及菠萝蛋白酶在加载电流的条件下进行第二次酶解,其中,电流装置包括一对中空的圆柱形的电极罩,电极罩底部敞开、顶部连接有导线,一对电极罩上的导线分别与正电源和负电源连接;步骤四、过滤、干燥即可。本发明具有提高蹄甲多肽得率和相对分子质量为10000~3500的蛋白质或多肽的比例的有益效果。
技术领域
本发明涉及汽车涉水领域。更具体地说,本发明涉及一种蹄甲多肽的制备方法。
背景技术
蹄甲多肽是从猪蹄甲中经水解获取的具有生物活性的多肽组分,具有显著的止血、抗炎、调整内分泌、提高机体免疫等功能,对功能性子宫出血症、月经不调等妇科疾病,具有独特的治疗作用,而且未出现任何毒副作用,临床上已广泛应用。目前,生产蹄甲多肽的方法主要碱水解法,或者碱水解法与酶解结合的方法,但蹄甲多肽的得率和及药效均不太理想。
而且蹄甲多肽中,相对分子质量在30000以上的多肽药理作用较弱,相对分子质量在10000以下的多肽具有显著的凝血和抗炎作用,并表现有抑制子宫收缩的倾向,相对分子质量在3500以下的多肽具有显著的兴奋子宫作用,促凝血和抗炎作用也较强,相对分子质量在10000到3500的多肽均含有分子大小相近而电荷不同的多肽,而现有蹄甲多肽的制备方法均要么水解过度,氨基氮含量过高,而相对分子质量在10000到3500的多肽占比较少,要么水解不够,相对分子质量在30000以上的多肽占比较多,因此提高蹄甲多肽中相对分子质量在10000到3500的占比,可以提高药效
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题,并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种蹄甲多肽的制备方法,不仅可以提高蹄甲多肽得率,还可以提高相对分子质量为10000~3500的蛋白质或多肽的占比。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点,提供了一种蹄甲多肽的制备方法,包括以下步骤,以下原料按重量份数计:
步骤一、原料前处理:将蹄甲置于淀粉溶液中浸泡2h,然后将蹄甲和淀粉溶液一起依次置于45℃水浴条件下搅拌30min,置于零下10℃条件下冷冻30min,进行超声处理,超声处理条件为80KHz频率、60℃、15min,然后取出蹄甲用纯水冲洗干净;
其中,淀粉溶液的配制方法为:将10份玉米淀粉、2份面粉、1份苏打、0.5份玉米油、0.5份香葱粉、以及50份水混合,并于70℃水浴条件下搅拌20min,搅拌速度为1000转/min,即得淀粉溶液;
步骤二、第一次酶解:将100份步骤一处理后的蹄甲置于70℃条件下热风干燥50min,然后粉碎至粒径小于25μm,将蹄甲粉末与100份生姜蛋白酶溶液混合均匀,于60℃水浴条件下静置0.5h,加入0.7份乙醇,继续于60℃水浴条件下静置1h,然后于70℃水浴条件下静置10min,冷却至45℃以下后,调节PH值至9,再加入0.3份角蛋白酶,置于45℃水浴条件下搅拌1.5h,再加入0.2份乙醇,继续于45℃水浴条件下静置2h,然后于70℃水浴条件下静置10min,过滤取蹄甲滤液;
其中,生姜蛋白酶溶液的制备方法为:将100份纯水、5份生姜蛋白酶、5份卵磷脂、以及1份维生素B混合均匀,即得生姜蛋白酶溶液;
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