[发明专利]基于天然组织来源的脑组织脱细胞材料的制备方法在审
申请号: | 201810294593.5 | 申请日: | 2018-04-04 |
公开(公告)号: | CN108578774A | 公开(公告)日: | 2018-09-28 |
发明(设计)人: | 林贤丰;王辉;范顺武;王晟毓 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | A61L27/36 | 分类号: | A61L27/36;A61L27/50 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 忻明年 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了基于天然组织来源的脑组织脱细胞材料的制备方法,将哺乳动物任意大小的脑组织材料经含蛋白酶抑制剂的生理盐水、含蛋白酶抑制剂的PBS、含Triton X的PBS缓冲液、含SDS的PBS缓冲液、含DNA酶的PBS缓冲液处理,获得天然组织来源的脑组织脱细胞材料。本发明所采用的脑组织是天然来源的生物材料,具有很好的生物相容性和取材广泛性。采用脱细胞技术获得的脑脱细胞材料不含细胞等抗原物质,可使受体的免疫排斥反应降到最低限度。脱细胞技术在去除异种细胞的同时,可保留原先ECM的完整性,具有良好的细胞外微环境等,可以最大限度的模拟正常脑组织结构。 | ||
搜索关键词: | 脱细胞 脑组织 天然组织 蛋白酶抑制剂 制备 免疫排斥反应 生物相容性 正常脑组织 细胞 技术获得 抗原物质 生理盐水 生物材料 天然来源 异种细胞 哺乳动物 微环境 去除 取材 保留 | ||
【主权项】:
1.基于天然组织来源的脑组织脱细胞材料的制备方法,其特征在于,该方法具体包括以下步骤:(1)取宰杀12h以内任意哺乳动物脑组织,用含蛋白酶抑制剂的PBS缓冲液漂洗3次,每次30min,去除血液,贴附的脂肪碎片和其他杂质;(2)在含蛋白酶抑制剂的PBS缓冲液中,在4℃温度下用摇床100rpm震荡4‑14小时;然后用液氮冻融3个循环;(3)在含Triton X的PBS缓冲液中,加入混合抗菌液,在4℃温度下用摇床100rpm震荡4‑12小时;(4)在含SDS的PBS缓冲液中,加入混合抗菌液,在4℃温度下用摇床100rpm震荡4‑12小时;(5)在含DNA酶的PBS缓冲液中,加入混合抗菌液,37℃摇床120rpm震荡4‑12小时;步骤(2)‑(5)中,每个步骤完成后均用生理盐水冲洗5小时。
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