[发明专利]一种甜瓜白粉病病菌的离体保存方法有效
| 申请号： | 201810231262.7 | 申请日： | 2018-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN108315260B | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 赵光伟;徐永阳;王平勇;贺玉花;徐志红;孔维虎;张健 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院郑州果树研究所 |
| 主分类号： | C12N1/04 | 分类号： | C12N1/04;C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司： | 41111 郑州大通专利商标代理有限公司 | 代理人： | 陈勇 |
| 地址： | 450009 河南省郑州*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明属于生物病原菌保存技术领域，具体涉及一种甜瓜白粉病病菌的离体保存方法。该方法包括以下步骤：步骤1：配制培养基，然后将培养基加入到高压蒸汽灭菌后的培养皿中；步骤2：培养基凝固后，在培养基上放入1～2层吸水纸。步骤3：将感白粉病甜瓜品种的种子进行水培，待幼苗长出第1片真叶后，取幼苗的子叶，然后将消毒后的子叶平放在吸水纸上；步骤4：取白粉病病菌，对子叶进行接种。步骤5：接种后盖上培养皿盖子，并将培养皿置于温度20℃、光照度2000勒克斯、光周期（白天/黑夜）12小时/12小时环境下进行培养；步骤6：35～42天后，对所述子叶上的白粉病病菌进行转接。该方法操作非常简便，成本低，病菌保存时间较长。 | ||
| 搜索关键词： | 病菌 培养基 培养皿 子叶 白粉病 甜瓜白粉病 离体保存 吸水纸 幼苗 接种 病原菌 高压蒸汽灭菌 后盖 甜瓜品种 小时环境 转接 光照度 光周期 保存 盖子 放入 水培 真叶 配制 黑夜 凝固 消毒 | ||
【主权项】：
1.一种甜瓜白粉病病菌的离体保存方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤1：配制培养基：每1000毫升无菌水中加入8克琼脂、6.8克蔗糖、18.2克甘露醇和400微升质量分数25%的那他霉素溶液；然后将培养基加入到高压蒸汽灭菌后的培养皿中；/n步骤2：培养基凝固后，在培养基上放1～2层高压蒸汽灭菌后的吸水纸；/n所述吸水纸上具有圆孔，所述圆孔的直径为4～6mm；/n步骤3：将感白粉病甜瓜品种的种子进行水培，待幼苗长出第1片真叶后，在超净工作台上取幼苗的子叶，将子叶在体积分数75%的酒精中浸泡3秒钟后用无菌水冲洗3次，然后将子叶平放在培养皿中，所述子叶的下表面向下；所述子叶的叶柄下端位于圆孔内，并与培养基接触；/n步骤4：在甜瓜产区选取甜瓜白粉病感病植株，先用洗耳球将甜瓜白粉病感病植株叶片上的白粉病病斑表面的老孢子吹掉，第二天用接种环取直径3mm白粉病病斑内的新鲜孢子，接种到步骤3中所述子叶上；/n步骤5：接种后盖上培养皿盖子，并将培养皿放在温度20℃、光照度2000勒克斯、光周期12小时/12小时环境下进行培养；/n步骤6：35～42天后，对所述子叶上的白粉病病菌进行转接。/n
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