[发明专利]一种文心兰杂交种子无菌播种的育苗方法

摘要

本发明提供一种文心兰杂交种子无菌播种的育苗方法，选用成熟但未开裂的文心兰杂交蒴果，经预处理后，并通过种子萌发培养、原球茎分化培养、生根培养、试管苗移栽以达到快速育苗的目的。采用本发明育苗方法仅需5至7个月就能获得文心兰杂交种苗；育苗过程中不仅种子萌发率高、原球茎增殖率低、原球茎分化快，而且分化后无需进行壮苗培养即可进行后续的生根培养，简化了培养环节、极大地缩短了育苗时间、降低了育苗成本，进而提高了育苗效率；另外，经由本发明培养的试管苗健壮、根系发达，且通过驯化炼苗，其环境适应能力较强，从而提高了种苗移栽成活率。

主权项

1.一种文心兰杂交种子无菌播种的育苗方法，其特征在于：该育苗方法包括如下具体操作步骤：(1)种子的选择与消毒：采摘成熟但未开裂的文心兰杂交蒴果，在超净工作台上，先用75％的酒精浸泡过的脱脂棉擦洗蒴果表面，然后用1～2g/L的HgCl2水溶液浸泡灭菌10～15min，接着取出用无菌水冲洗2～3次，再用无菌吸水纸擦干表面水分，之后在无菌器皿上切开蒴果，将蒴果内种子或含有种子的絮状物取出，备用；(2)种子萌发培养：取步骤(1)获得的种子或含有种子的絮状物，并接种到种子萌发培养基中进行萌发培养，培养周期60～110d后获得原球茎；(3)原球茎分化培养：将步骤(2)获得的原球茎转接到原球茎分化培养基中进行分化培养，培养周期50～60d后获得再生小苗；(4)生根培养：将步骤(3)获得的再生小苗切割成单苗，并接种到生根培养基上进行生根培养，培养周期40～50d即获得株高5.0～8.0cm、根数2～8条的完整植株，且生根率100％；(5)试管苗移栽：移栽前，将步骤(4)获得的瓶苗于温室中进行炼苗至适应栽培环境，炼苗完成后用自来水洗净根部粘连的培养基，之后将苗置于1.0～2.0g/L广谱杀菌剂水溶液中浸泡消毒5～10min，取出晾干表面水分，接着用水苔包住根部植入育苗杯中，然后置于温室层架上进行常规栽培管理即可；其中，种子萌发培养基的组分为：花宝1号1.0～2.0g/L、NH4NO3 550～1100mg/L、KNO3 600～1300mg/L、CaCl2·2H2O 150～300mg/L、MgSO4·7H2O 120～250mg/L、KH2PO4 60～115mg/L、KI 0.83mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO2·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.025mg/L、CoCl2·6H2O 0.025mg/L、FeSO4·7H2O 13.9mg/L、Na2·EDTA 18.7mg/L、肌醇100mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5～1.0mg/L、盐酸硫胺素0.1～0.2mg/L、甘氨酸2.0mg/L、椰子汁100～150g/L、水解乳蛋白1.0～1.5g/L、白糖15～25g/L、活性炭1.0g/L、凝固剂6.5～7.0g/L、6‑苄氨基嘌呤0.3～0.6mg/L、及萘乙酸0.05～0.2mg/L；原球茎分化培养基的组分为：花宝1号1.0～2.0g/L、NH4NO3 550～1100mg/L、KNO3 600～1300mg/L、CaCl2·2H2O 150～300mg/L、MgSO4·7H2O 120～250mg/L、KH2PO4 60～115mg/L、KI 0.83mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO2·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.025mg/L、CoCl2·6H2O 0.025mg/L、FeSO4·7H2O 13.9mg/L、Na2·EDTA 18.7mg/L、肌醇100mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5～1.0mg/L、盐酸硫胺素0.1～0.2mg/L、甘氨酸2.0mg/L、马铃薯泥100～150g/L、水解乳蛋白1.0～1.5g/L、白糖20～30g/L、活性炭1.0g/L、凝固剂6.5～7.0g/L、6‑苄氨基嘌呤0.05～0.2mg/L、及萘乙酸0.05～0.2mg/L；生根培养基的组分为：NH4NO3 550～1100mg/L、KNO3 600～1300mg/L、CaCl2·2H2O 150～300mg/L、MgSO4·7H2O 120～250mg/L、KH2PO4 60～115mg/L、KI 0.83mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO2·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.025mg/L、CoCl2·6H2O 0.025mg/L、FeSO4·7H2O 13.9mg/L、Na2·EDTA 18.7mg/L、肌醇100mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5～1.0mg/L、盐酸硫胺素0.1～0.2mg/L、甘氨酸2.0mg/L、马铃薯泥100～200g/L、白糖20～30g/L、活性炭1.0g/L、凝固剂6.5～7.0g/L、及萘乙酸0.1～0.3mg/L。