[发明专利]一种通用引物单荧光分子检测技术及试剂盒在审
申请号: | 201810206239.2 | 申请日: | 2018-03-13 |
公开(公告)号: | CN108410956A | 公开(公告)日: | 2018-08-17 |
发明(设计)人: | 许文涛;罗云波;牛晨启;黄昆仑;徐媛聪;杜再慧;贺晓云 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851;C12N15/11;C12Q1/6895 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100083 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种多重数字PCR检测方法及引物、探针和试剂盒。本发明将通用引物与多重数字PCR进行结合应用,开发出了一种新的核酸检测方法,至少实现了微量、灵敏、精准度高的高通量多重核酸的检测特别是转基因的检测。此外,本发明通过对通用引物种类、浓度以及各修饰特异引物浓度等因素进行优化,建立了一套通量高、特异性强的多重转基因成分筛查检测体系或试剂盒。通过对该体系特异性的验证,确保该检测体系可以满足我国进口口岸的各类转基因成分检测的需要。 | ||
搜索关键词: | 试剂盒 检测 通用引物 数字PCR 转基因 转基因成分检测 核酸检测 检测技术 结合应用 特异性强 特异引物 荧光分子 高通量 精准度 核酸 筛查 探针 通量 引物 修饰 灵敏 物种 验证 口岸 通用 进口 优化 开发 | ||
【主权项】:
1.一种分子检测方法,所述方法包括多重数字PCR反应,所述多重数字PCR反应的反应体系中,包括一对以上用于扩增不同待测分子的特异引物对,其特征在于:所述方法还包括下述1)‑2)所述中的至少一种:1)所述反应体系中的所有特异引物对中的每条引物均包括一段核苷酸序列相同的核酸片段Ⅰ;所述反应体系中还包括通用引物,所述通用引物的核苷酸序列中也包括所述核酸片段Ⅰ;2)所述特异引物对包括上游引物和下游引物;所述反应体系中的所有特异引物对的上游引物包括一段核苷酸序列相同的核酸片段Ⅱ;所述反应体系中的所有特异引物对的下游引物也包括一段核苷酸序列相同的核酸片段Ⅲ;所述反应体系中还包括通用引物对,所述通用引物对的上游引物的核苷酸序列中包括核酸片段Ⅱ,所述通用引物对的下游引物的核苷酸序列中包括核酸片段Ⅲ。
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