[发明专利]一种菠萝泛菌的PCR检测方法在审
申请号: | 201810205789.2 | 申请日: | 2018-03-13 |
公开(公告)号: | CN108342498A | 公开(公告)日: | 2018-07-31 |
发明(设计)人: | 司丙文;张小利;屠焰;王晓鸣 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院饲料研究所 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686 |
代理公司: | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人: | 赵红霞 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种菠萝泛菌的PCR检测方法,以菠萝泛菌的基因组DNA作为PCR反应模板进行PCR反应;PCR反应体系为:10×PCR Buffer2.5μL;10mM dNTP 1.0μL;10mM上游引物PanITS2‑1F 1.0μL;10mM下游引物PanITS2‑1R 1.0μL;模板DNA 1.0μL;2.5U/mL Taq酶0.5μL;ddH2O 18.0μL;反应条件为:94℃预变性3min,94℃变性30s,50℃退火15s,72℃延伸25S,25个循环。本发明能够快速特异准确的检测到植株材料中的菠萝泛菌,为玉米细菌斑点病的早期诊断、检疫和病害的早期预警提供了一种方法,也可为该菌株在其他环境中的快速检测提供一种方法。 | ||
搜索关键词: | 菠萝泛菌 退火 基因组DNA 反应条件 快速检测 上游引物 细菌斑点 下游引物 早期预警 早期诊断 植株材料 模板DNA 预变性 变性 菌株 病害 检疫 玉米 检测 延伸 | ||
【主权项】:
1.一种菠萝泛菌的PCR检测方法,其特征在于,以菠萝泛菌的基因组DNA作为PCR反应模板进行PCR反应;PCR反应体系为:10×PCR Buffer 2.5μL;10mM dNTP 1.0μL;10mM上游引物PanITS2‑1F 1.0μL;10mM下游引物PanITS2‑1R 1.0μL;模板DNA 1.0μL;2.5U/mL Taq酶0.5μL;ddH2O 18.0μL;反应条件为:94℃预变性3min,94℃变性30s,50℃退火15s,72℃延伸25S,25个循环;所述上游引物PanITS2‑1F为:5’‑TCGCCTGATTATACAATCTCACCTTCA‑3’;所述下游引物PanITS2‑1R为5’‑GTGGGTTGTGAGGTTAAGCGACTAA‑3’。
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