[发明专利]一种高通量文库构建试剂盒及其应用在审
申请号: | 201810170706.0 | 申请日: | 2018-03-01 |
公开(公告)号: | CN108149326A | 公开(公告)日: | 2018-06-12 |
发明(设计)人: | 王金龙;吕灵双;石太平;刘如银 | 申请(专利权)人: | 北京创新乐土生物科技有限公司 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 102206 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种高通量文库构建试剂盒及其应用。利用本发明的文库构建试剂盒构建文库的具体流程如下:首先使用内切酶将待测样本的基因组DNA进行平末端修复,将末端补平;然后将修复后片段的3'端用连接酶加上一个腺嘌呤A,再用TA连接方法加上接头,最后进行PCR扩增,富集连接好接头的DNA片段,达到上机测序所需的浓度及片段区间。本发明相比于国内外市场上其他建库试剂盒,DNA片段与接头的连接效率更高,解决了文库构建中的接头自连的残留问题,且连接后在保证固定浓度的同时,杂质去除地更为干净,最主要的是节约了大量成本,在高通量测序中的DNA文库构建方面具有良好市场前景。 | ||
搜索关键词: | 文库构建 试剂盒 高通量 构建 修复 高通量测序 基因组DNA 待测样本 连接效率 杂质去除 连接酶 内切酶 平末端 腺嘌呤 补平 测序 富集 建库 上机 文库 应用 残留 节约 保证 | ||
【主权项】:
一种用于DNA文库构建的试剂盒,其包括如下试剂:PNK缓冲液、T4DNA聚合酶、dNTP溶液、克列诺酶、T4多聚核苷酸激酶、Blue缓冲液、三磷酸脱氧腺苷、大肠杆菌DNA聚合酶I、快速连接缓冲液、T4DNA连接酶和PCR扩增缓冲液。
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