[发明专利]一种青蛤免疫调节多肽的制备方法在审
申请号: | 201810044505.6 | 申请日: | 2018-01-17 |
公开(公告)号: | CN108396046A | 公开(公告)日: | 2018-08-14 |
发明(设计)人: | 余方苗;叶盛旺;李维;唐云平;黄芳芳;杨最素;丁国芳 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K7/08;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16 |
代理公司: | 杭州九洲专利事务所有限公司 33101 | 代理人: | 翁霁明 |
地址: | 316022 浙江省舟*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 一种青蛤免疫调节多肽的制备方法,所述的制备方法包括如下步骤:a)将青蛤肉清洗、用捣碎机将青蛤肉捣碎制成浆料;b)酶解:选用蛋白酶对青蛤肉浆料进行酶解,制成酶解液;c)超滤:将酶解液加入超滤系统,用10KD、5KD、3KD的超滤膜进行超滤,收集>10KD、10‑5KD、5‑3KD和<3KD分子量的酶解液;d)将酶解液用葡聚糖凝胶Sephadex G25进行凝胶柱层析和缓冲液洗脱,分别收集各峰后,取有生物活性的峰再用反相高效液相色谱(RT‑HPLC)纯化;e)经过反相高效液相色谱(RT‑HPLC)纯化及氨基酸序列检测,获得青蛤免疫调节多肽产品。 | ||
搜索关键词: | 青蛤 酶解液 免疫调节多肽 制备 反相高效液相色谱 超滤 酶解 蛋白酶 氨基酸序列 凝胶柱层析 葡聚糖凝胶 捣碎 超滤系统 生物活性 超滤膜 捣碎机 缓冲液 肉浆料 浆料 洗脱 清洗 检测 | ||
【主权项】:
1.一种青蛤免疫调节多肽的制备方法,其特征在于所述的制备方法包括如下步骤:a)将青蛤肉清洗、用捣碎机将青蛤肉捣碎制成浆料;b)酶解:选用蛋白酶对青蛤肉浆料进行酶解,制成酶解液;c)超滤:将酶解液加入超滤系统,用10KD、5KD、3KD的超滤膜进行超滤,收集>10KD、10‑5KD、5‑3KD和<3KD分子量的酶解液;d)将酶解液用葡聚糖凝胶Sephadex G25进行凝胶柱层析和缓冲液洗脱,分别收集各峰后,取有生物活性的峰再用反相高效液相色谱(RT‑ HPLC)纯化;e)经过反相高效液相色谱(RT‑ HPLC)纯化及氨基酸序列检测,获得青蛤免疫调节多肽产品,其青蛤活性多肽的氨基酸序列为Arg‑Val‑Ala‑Pro‑Glu‑Glu‑His‑Pro‑Val‑Glu‑Gly‑Arg‑Tyr‑Leu‑Val,分子量为1751.3 Da。
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