[发明专利]一种富硒罗伊氏乳杆菌高密度发酵的方法

摘要

本发明公开了一种富硒罗伊氏乳杆菌高密度发酵的方法，采用改善后含蔗糖的培养基获得高密度发酵的富硒罗伊氏乳杆菌的菌体，增加了单位体积发酵液消化吸收无机硒的能力，同时通过二阶段补硒控制发酵液中硒浓度处于较低水平，便于乳酸菌利用发酵过程，将发酵液中的无机硒，完全转化为乳酸菌体内的有机硒，此外由于控制了发酵过程的硒浓度，菌体生长不受抑制，可在24h内达到较高的活菌浓度，解决了传统工艺上培养基中无机硒含量远高于乳酸菌的耐受能力而造成乳酸菌生长缓慢的问题，同时避免了所得菌体包含单质硒的问题。因此本发明获得的富硒罗伊氏乳杆菌发酵液兼具完全有机硒和高活菌数的优点。此外，本发明最终获得的微生态制剂只含有有机硒。

主权项

1.一种富硒罗伊氏乳杆菌高密度发酵的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将罗伊氏乳杆菌从平板接种到种子培养基中，37℃厌氧培养12-18h，每升种子培养基配方包括以下原料：20g蔗糖、20g酵母浸膏、3.0g磷酸氢二钾，7.0g乙酸钠、1.0g柠檬酸铵、0.2g硫酸镁、0.18g硫酸锰、1.0g吐温80和余量的蒸馏水，配置时用磷酸调pH至6.2后得到种子培养基；(2)将种子按3％-10％接种量接种到发酵培养基中，厌氧培养16-24h，每升发酵培养基配方包括：80-150g蔗糖、80-150g酵母浸膏、2-7g柠檬酸铵、5-9g乙酸钠、2-6g磷酸氢二钾、0.2-0.6g硫酸锰、0.5-0.8g硫酸镁和1-3g吐温80，配置时用磷酸调pH至5.5-6.2后得到发酵培养基；(3)在步骤(2)发酵进行到4h，每升发酵培养基中加入浓度为1g/L亚硒酸钠溶液1.1-3.3ml；发酵进行到12-16h,每升发酵培养基补加浓度为1g/L亚硒酸钠溶液1.1-3.3ml，发酵进行到20-24h后发酵完成，得到终点发酵液。