[发明专利]一种利用润楠粗酶液清除双酚A的方法及系统

摘要

本发明属于植物生物技术领域，公开了一种利用润楠粗酶液清除双酚A的方法及系统，方法包括：粗酶液提取：称取润楠成熟叶适量，按照1:6的料液比加入配制的提取液，高速匀浆机匀浆10分钟，匀浆液置于冷冻离心机4℃、5000r/min离心30min，弃上层溶液，抽出下相溶液得粗酶液；移取缓冲液，控制反应体系等。本发明酶促反应具有催化效率高、反应条件温和、具有良好的可调节性等特点；应用润楠粗酶液清除双酚A可大大提高清除效果，达到有效的去除环境污染物的目的。 1

主权项

1.一种利用润楠粗酶液清除双酚A的方法，其特征在于，所述利用润楠粗酶液清除双酚A的方法包括：

粗酶液提取：称取润楠成熟叶适量，按照1:6的料液比加入配制的提取液，高速匀浆机匀浆10分钟，匀浆液置于冷冻离心机4℃、5000r/min离心30min，弃上层溶液，抽出下相溶液得粗酶液；

移取缓冲液，控制反应体系，加入酶液，使得反应体系中双酚A浓度为0.2mg/ml，温度控制在10～60℃，缓冲液pH值控制在3.0～11.0，在未加入过氧化氢时，取样1ml作空白对照，之后按照双酚A与过氧化氢摩尔浓度比1:2～1:20加入过氧化氢启动反应，反应全过程在搅拌下进行，在反应开始后的各1min、3min、5min、15min、45min、90min、120min、180min分别取样1ml，加人至2ml甲醇中以终止反应。

2.如权利要求1所述的利用润楠粗酶液清除双酚A的方法，其特征在于，提取液配制，包括：

取纯水，加入不溶性聚乙烯吡咯烷酮PVP‑P使其浓度为2％，在搅拌状态下缓慢加入硫酸铵以及聚乙二醇PEG2000，使其浓度均达到20％，4℃冰箱预冷备用。

3.如权利要求1所述的利用润楠粗酶液清除双酚A的方法，其特征在于，所述缓冲液为柠檬酸缓冲液50mmol/L；所述的pH值为5.0～6.0。

4.如权利要求1所述的利用润楠粗酶液清除双酚A的方法，其特征在于，所述双酚A初始浓度为0.2mg/ml。

5.如权利要求1所述的利用润楠粗酶液清除双酚A的方法，其特征在于，所述反应温度为25℃；所述反应时间为180min；过氧化氢与BPA浓度比值为2：1。

6.一种如权利要求1所述利用润楠粗酶液清除双酚A的方法的利用润楠粗酶液清除双酚A系统。