[发明专利]一种利用润楠粗酶液清除双酚A的方法及系统在审
| 申请号: | 201810037092.9 | 申请日: | 2018-01-15 |
| 公开(公告)号: | CN108163961A | 公开(公告)日: | 2018-06-15 |
| 发明(设计)人: | 肖强;高艳芳;王楠;周秀梅;张小萌;王雨雪 | 申请(专利权)人: | 湖北民族学院 |
| 主分类号: | C02F1/72 | 分类号: | C02F1/72;C12N9/08;C02F101/34 |
| 代理公司: | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人: | 赵红霞 |
| 地址: | 445000*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 粗酶液 双酚A 控制反应体系 植物生物技术 粗酶液提取 高速匀浆机 环境污染物 冷冻离心机 催化效率 反应条件 可调节性 酶促反应 成熟叶 缓冲液 料液比 提取液 匀浆液 称取 去除 移取 匀浆 配制 抽出 上层 应用 | ||
1.一种利用润楠粗酶液清除双酚A的方法,其特征在于,所述利用润楠粗酶液清除双酚A的方法包括:
粗酶液提取:称取润楠成熟叶适量,按照1:6的料液比加入配制的提取液,高速匀浆机匀浆10分钟,匀浆液置于冷冻离心机4℃、5000r/min离心30min,弃上层溶液,抽出下相溶液得粗酶液;
移取缓冲液,控制反应体系,加入酶液,使得反应体系中双酚A浓度为0.2mg/ml,温度控制在10~60℃,缓冲液pH值控制在3.0~11.0,在未加入过氧化氢时,取样1ml作空白对照,之后按照双酚A与过氧化氢摩尔浓度比1:2~1:20加入过氧化氢启动反应,反应全过程在搅拌下进行,在反应开始后的各1min、3min、5min、15min、45min、90min、120min、180min分别取样1ml,加人至2ml甲醇中以终止反应。
2.如权利要求1所述的利用润楠粗酶液清除双酚A的方法,其特征在于,提取液配制,包括:
取纯水,加入不溶性聚乙烯吡咯烷酮PVP-P使其浓度为2%,在搅拌状态下缓慢加入硫酸铵以及聚乙二醇PEG2000,使其浓度均达到20%,4℃冰箱预冷备用。
3.如权利要求1所述的利用润楠粗酶液清除双酚A的方法,其特征在于,所述缓冲液为柠檬酸缓冲液50mmol/L;所述的pH值为5.0~6.0。
4.如权利要求1所述的利用润楠粗酶液清除双酚A的方法,其特征在于,所述双酚A初始浓度为0.2mg/ml。
5.如权利要求1所述的利用润楠粗酶液清除双酚A的方法,其特征在于,所述反应温度为25℃;所述反应时间为180min;过氧化氢与BPA浓度比值为2:1。
6.一种如权利要求1所述利用润楠粗酶液清除双酚A的方法的利用润楠粗酶液清除双酚A系统。
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