[发明专利]一种铅离子敏感型全细胞生物传感器的构建方法在审
申请号: | 201810032692.6 | 申请日: | 2018-01-12 |
公开(公告)号: | CN108251446A | 公开(公告)日: | 2018-07-06 |
发明(设计)人: | 贾晓强;卜蓉蓉;刘一琳;吴康 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N1/21;G01N21/64;C12R1/19 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 王丽 |
地址: | 300350 天津市津南区海*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种铅离子敏感的具有基因级联放大表达系统的全细胞生物传感器及构建方法;将人工全合成双向启动子Ppbr以及铅离子特异性结合蛋白PbrR如SEQ ID No.1所示核苷酸序列与质粒pGN68所含自反馈调控蛋白LuxR的SEQ ID No.4的核苷酸序列通过酶切方式连接,筛选阳性克隆得到目标重组载体pET28a‑pbr‑lux;质粒pGN68含有自反馈启动子PluxRI、绿色荧光蛋白基因核苷酸序列、自反馈调控蛋白LuxR核苷酸序列,按照酶切方式依次连接;利用大肠杆菌E.coli DH5α作为宿主,将重组载体以及质粒pGN68共转化,得到对铅离子敏感性的全细胞生物传感器。 | ||
搜索关键词: | 核苷酸序列 铅离子 生物传感器 全细胞 自反馈 质粒 调控蛋白 构建 酶切 绿色荧光蛋白基因 特异性结合蛋白 宿主 目标重组载体 大肠杆菌 双向启动子 表达系统 阳性克隆 依次连接 重组载体 敏感 共转化 启动子 全合成 级联 放大 筛选 基因 | ||
【主权项】:
1.一种对铅离子敏感的具有基因级联放大表达系统的全细胞生物传感器。
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