[发明专利]一种铅离子敏感型全细胞生物传感器的构建方法在审
| 申请号： | 201810032692.6 | 申请日： | 2018-01-12 |
| 公开（公告）号： | CN108251446A | 公开（公告）日： | 2018-07-06 |
| 发明（设计）人： | 贾晓强;卜蓉蓉;刘一琳;吴康 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;G01N21/64;C12R1/19 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 王丽 |
| 地址： | 300350 天津市津南区海*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 核苷酸序列 铅离子 生物传感器 全细胞 自反馈 质粒 调控蛋白 构建 酶切 绿色荧光蛋白基因 特异性结合蛋白 宿主 目标重组载体 大肠杆菌 双向启动子 表达系统 阳性克隆 依次连接 重组载体 敏感 共转化 启动子 全合成 级联 放大 筛选 基因 | ||
【权利要求书】：
1.一种对铅离子敏感的具有基因级联放大表达系统的全细胞生物传感器。
2.权利要求1对铅离子敏感的具有基因级联放大表达系统的全细胞生物传感器的构建方法；
包括如下步骤：
(1)将人工全合成双向启动子Ppbr以及铅离子特异性结合蛋白PbrR如SEQ ID No.1所示核苷酸序列与质粒pGN68所含自反馈调控蛋白LuxR的SEQ ID No.4的核苷酸序列通过酶切方式连接，筛选阳性克隆得到目标重组载体pET28a-pbr-lux；质粒pGN68含有自反馈启动子PluxRI其核苷酸序列如SEQ ID No.3所示、绿色荧光蛋白基因核苷酸序列如SEQ ID No.2所示、自反馈调控蛋白LuxR核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，按照酶切方式依次连接；
(2)利用大肠杆菌E.coli DH5α作为宿主，将重组载体pET28a-pbr-lux以及质粒pGN68共转化，得到对铅离子敏感性的全细胞生物传感器。
3.利用权利要求1或2的传感器对铅离子的检测方法，以E.coli DH5α为宿主菌，通过荧光强度与铅离子浓度的关系制作标准曲线，从而对环境中的铅离子进行定量。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于天津大学，未经天津大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810032692.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
