[发明专利]一种与卵泡刺激素剂量呈线性相关的基因的筛选方法有效
申请号: | 201810031478.9 | 申请日: | 2018-01-12 |
公开(公告)号: | CN108070640B | 公开(公告)日: | 2021-09-21 |
发明(设计)人: | 潘建治;贾若欣;刘甜;朱志伟;陈晓宇;于福先;黄菁 | 申请(专利权)人: | 浙江省农业科学院 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851 |
代理公司: | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人: | 沈渊琪 |
地址: | 310021 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 一种与卵泡刺激素剂量呈线性相关的基因的筛选方法,属于家畜基因工程技术领域。其包括以下步骤:确定FSH效价评定用细胞株;获得FSH剂量依赖表达的候选基因;筛选出与卵泡刺激素剂量呈线性相关的基因。通过本发明的方法能够筛选出与卵泡刺激素剂量呈线性相关的基因,通过该基因为后续制定出能快速、有效、灵敏、精确的检测出FSH效价的方法提供基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 卵泡 刺激素 剂量 线性 相关 基因 筛选 方法 | ||
【主权项】:
1.一种与卵泡刺激素剂量呈线性相关的基因的筛选方法,其特征在于包括以下步骤:1) 选择待筛选细胞株,采用40IU/L浓度的FSH处理48h后,采用半定量PCR方法检测分析各细胞对FSH刺激的反应敏感性,确定FSH效价评定用细胞株;2) 对上述选定细胞经40IU/L浓度的FSH处理18h后,利用转录组测序检测出差异显著表达的基因,并对其中FSH上调基因差异倍数显著的基因进行实时荧光定量PCR检测验证,获得FSH剂量依赖表达的候选基因;3) 运用实时荧光定量PCR分析上述候选基因在FSH剂量梯度0、20、40、60、80、100IU/L下的表达变化,筛选出与卵泡刺激素剂量呈线性相关的基因。
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