[发明专利]测定甜高粱茎杆干样可溶性糖含量的方法在审

专利信息
申请号: 201810030850.4 申请日: 2018-01-12
公开(公告)号: CN108362691A 公开(公告)日: 2018-08-03
发明(设计)人: 郑甲成;刘婷;李杰勤;石松;王丽华;詹秋文;刘言龙 申请(专利权)人: 安徽科技学院
主分类号: G01N21/78 分类号: G01N21/78
代理公司: 合肥律通专利代理事务所(普通合伙) 34140 代理人: 郑松林
地址: 233000 安徽省蚌埠市*** 国省代码: 安徽;34
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摘要: 发明提供一种测定甜高粱茎杆干样可溶性糖含量的方法,步骤包括:试剂的配置;样品测定;利用比色法测定化合物的吸光值判断甜高粱茎杆的含糖量。苯酚硫酸法测定可溶性总糖方法简单,试剂便宜,所用实验仪器较少,灵敏度较高,实验过程中基本不受蛋白质存在的影响,并且产生的颜色可稳定3h左右,便于试验操作。
搜索关键词: 甜高粱茎杆 可溶性糖 干样 苯酚硫酸法 可溶性总糖 实验过程 实验仪器 试验操作 样品测定 灵敏度 比色法 含糖量 吸光 蛋白质 配置
【主权项】:
1.一种测定甜高粱茎杆干样可溶性糖含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:一、试剂的配置A、9g/ml苯酚溶液:将苯酚晶体,密度1.017g/ml,于60℃水浴锅溶解,取88.496ml苯酚液体加入含有10ml蒸馏水的容量瓶中;B、10mg/ml蔗糖标准液:称取蔗糖1g,于100ml容量瓶内,加5ml蒸馏水预溶后,缓慢加入0.25ml浓硫酸,立即充分摇匀,室温放置30s,继续缓慢加入0.25ml浓硫酸,立即充分摇匀,室温放置1min,用蒸馏水定容100ml;C、100μg/ml蔗糖溶液:吸取10mg/ml的蔗糖标准液1ml,定容至100ml;二、样品测定A、标准曲线制作:A1底物反应液准备:准备20ml刻度试管7支,依次编号:0‑7,其中0号为对照管),1‑6号为样品管,按下表配置测试样,总体积2ml:A2反应液配置:依次在7支试管加入9g/ml苯酚溶液1ml,充分混匀后,分别向7支试管依次迅速加入5ml浓硫酸,时间间隔10s以内;A3样品测定:反应液室温下放置30min,485nm波长下测定吸光度,绘制标准曲线,求出标准直线方程;B、甜高粱茎杆干样可溶性糖测定B1样品处理取甜高粱一个茎杆,烘干至恒重;利用植物样品粉碎机将茎杆干样粉碎,50目过筛后装于塑料袋中备用;B2可溶性总糖的提取称取甜高粱茎杆粉末3份,分别置于三支刻度试管中,0.3g/份,三支刻度试管中分别加入8ml蒸馏水,软木塞封口,于沸水中煮30min提取总糖,滤纸过滤提取液至25ml容量瓶中,继续漂洗试管2‑3次,定容,备用;B3测定①吸取以上提取液0.5ml至3个刻度试管中,分别加蒸馏水1.5ml后;②迅速加入9g/ml的苯酚溶液1ml,立即摇晃混匀,置于试管架上20s;③缓慢加入5ml浓硫酸,立即轻微摇晃混匀,防止液体飞溅;④4℃冰箱内放置10mim,显色,⑤485nm波长,测定吸光度,根据标准曲线,求得含糖量;三、结果计算按下式计算样品的糖含量式中,m:从标准曲线查得的糖含量,单位μg;Vt为提取液体积,单位ml;Vs为测定时取用的样品体积,单位ml;N为稀释倍数;m0为样品质量。
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