[发明专利]测定甜高粱茎杆干样可溶性糖含量的方法

说明书

本发明提供一种测定甜高粱茎杆干样可溶性糖含量的方法，步骤包括：试剂的配置；样品测定；利用比色法测定化合物的吸光值判断甜高粱茎杆的含糖量。苯酚硫酸法测定可溶性总糖方法简单，试剂便宜，所用实验仪器较少，灵敏度较高，实验过程中基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色可稳定3h左右，便于试验操作。

技术领域

本发明涉及甜高粱茎杆干样可溶性糖含量检测技术领域，尤其涉及一种测定甜高粱茎杆干样可溶性糖含量的方法。

背景技术

甜高粱的用途十分广泛，它不仅产粮食，也产糖、糖浆，还可以做酒、酒精和味精，纤维还可以造纸，甜高粱作为饲用及糖料作物被长期栽种。甜高粱收获期贮存量大，很难在短时间内全部加工，而鲜样不便于存放，很容易造成甜高粱的损失。因此，将甜高粱茎杆鲜样烘干后则可以长时间存放。可是样品烘干后，茎杆内部的糖分含量有何变化，很有必要建立一种稳定可靠的甜高粱茎杆干样可溶性糖含量的测定方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种测定甜高粱茎杆干样可溶性糖含量的方法，以解决上述技术问题。

本发明为解决上述技术问题，采用以下技术方案来实现：

一种测定甜高粱茎杆干样可溶性糖含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

一、试剂的配置

A、9g/ml苯酚溶液：将苯酚晶体，密度1.017g/ml，于60℃水浴锅溶解，取88.496ml苯酚液体加入含有10ml蒸馏水的容量瓶中；

B、10mg/ml蔗糖标准液：称取蔗糖1g，于100ml容量瓶内，加5ml蒸馏水预溶后，缓慢加入0.25ml浓硫酸，立即充分摇匀，室温放置30s，继续缓慢加入0.25ml浓硫酸，立即充分摇匀，室温放置1min，用蒸馏水定容100ml；

C、100μg/ml蔗糖溶液：吸取10mg/ml的蔗糖标准液1ml，定容至100ml；

二、样品测定

A、标准曲线制作：

A1底物反应液准备：准备20ml刻度试管7支，依次编号：0-7，其中0号为对照管)，1-6号为样品管，按下表配置测试样，总体积2ml：

A2反应液配置：依次在7支试管加入9g/ml苯酚溶液1ml，充分混匀后，分别向7支试管依次迅速加入5ml浓硫酸，时间间隔10s以内；

A3样品测定：反应液室温下放置30min，485nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线，求出标准直线方程；

B、甜高粱茎杆干样可溶性糖测定

B1样品处理

取甜高粱一个茎杆，烘干至恒重；利用植物样品粉碎机将茎杆干样粉碎，50目过筛后装于塑料袋中备用；

B2可溶性总糖的提取

称取甜高粱茎杆粉末3份，分别置于三支刻度试管中，0.3g/份，三支刻度试管中分别加入8ml蒸馏水，软木塞封口，于沸水中煮30min提取总糖，滤纸过滤提取液至25ml容量瓶中，继续漂洗试管2-3次，定容，备用；

B3测定

①吸取以上提取液0.5ml至3个刻度试管中，分别加蒸馏水1.5ml后；

②迅速加入9g/ml的苯酚溶液1ml，立即摇晃混匀，置于试管架上20s；

③缓慢加入5ml浓硫酸，立即轻微摇晃混匀，防止液体飞溅；

④4℃冰箱内放置10mim，显色，

⑤485nm波长，测定吸光度，根据标准曲线，求得含糖量；