[发明专利]一种阿法骨化醇片剂有关物质的检查方法

摘要

本发明公开了一种阿法骨化醇片剂有关物质的高效液相色谱分析方法，该方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈‑水的混合液为流动相，紫外检测器的波长为265nm，特别是采用了涡旋‑萃取‑浓缩的方式获得供试品溶液和对照溶液，极大地保证了该片剂中极低剂量的药物及其有关物质可以被检测到。本方法可同时分析阿法骨化醇片剂中所有已知杂质，并且可通过加校正因子的主成分自身对照法有效控制各已知杂质的含量，各杂质峰之间及主峰与相邻杂质峰之间的分离度均大于1.5，主峰与各杂质峰的峰纯度均大于1.0。本发明为阿法骨化醇片剂的质量控制提供了简易和可靠的分析方法。

主权项

1.一种阿法骨化醇片的有关物质检查方法，其特征在于，包含如下步骤：（1）取本品50片，置于50ml纳氏比色管中，加水，涡旋至片完全崩解，加乙酸乙酯，充分振摇，静置使分层，取上层溶液减压浓缩至干，重复上述过程共三次；浓缩至干的残渣中加入一定体积的甲醇‑水混合液，混匀，用玻璃注射器经0.45μm的聚四氟乙烯滤膜过滤，即得供试品溶液；精密量取100μl供试品溶液，置于10ml量瓶中，用甲醇‑水混合液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；（2）另取杂质PY1、杂质PY2、杂质PZB与阿法骨化醇适量，精密称定，加甲醇‑水混合液溶解并稀释制成每 l ml中含有阿法骨化醇5.0μg，杂质PY1、杂质PY2和杂质PZB各0.05μg的溶液，作为系统适用性溶液；照中国药典2015年版四部通则0512的高效液相色谱法测定，色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈‑水的混合液为流动相，乙腈：水的体积比为60‑90 : 40‑10，柱温为25‑35℃，紫外检测器检测波长为265nm，流速为1.0‑2.0 ml/min；精密量取系统适用性溶液和对照溶液500μl注入液相色谱仪，前阿法骨化醇峰，杂质PY1峰，杂质PY2峰，杂质PZB峰相对阿法骨化醇峰的相对保留时间分别约为0.85，0.92，1.1和1.24，各杂质峰与阿法骨化醇峰的分离度均符合要求；对照溶液中主峰的信噪比应大于10；（3）精密量取供试品溶液和对照溶液各500μl，注入液相色谱柱，记录色谱图至主峰保留时间的3倍；供试品溶液色谱图中如有杂质峰，以峰面积按加校正因子的主成分自身对照法计算，除前阿法骨化醇峰和辅料峰外，杂质PY1、杂质PY2和杂质PZB峰面积不得大于对照溶液主峰面积，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的5.0倍；其中，杂质PY1的结构如下所示，；杂质PY2的结构如下所示，；杂质PZB的结构如下所示，。