[发明专利]自体成纤维细胞培养方法在审
| 申请号： | 201711490595.3 | 申请日： | 2017-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN109988742A | 公开（公告）日： | 2019-07-09 |
| 发明（设计）人： | 刘建强;何晓;艾霞 | 申请（专利权）人： | 西安洛威塔生物科技有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 710000 陕西省西安市高新*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明提供一种自体成纤维细胞培养方法，其特征在于依次进行皮肤标本处理步骤、酶消化法获得成纤维细胞步骤及成纤维细胞培养步骤，本发明采用获取自体皮肤来源的成纤维细胞，使用基础培养基联合自体外周血来源的富含血小板的血浆及相关的细胞生长因子，进行成纤维细胞的扩增，使用时，回输的成纤维细胞来源于自体，安全性非常高，不会出现排异反应，回输后易于成活，能迅速分泌胶原蛋白，由于机体代谢功能的调节作用，并不会出现胶原蛋白过度增生的现象，因此除皱的效果十分自然。 | ||
| 搜索关键词： | 成纤维细胞 自体成纤维细胞 胶原蛋白 回输 成纤维细胞培养 机体代谢功能 皮肤标本处理 细胞生长因子 基础培养基 自体外周血 血小板 酶消化法 自体皮肤 增生的 除皱 富含 扩增 自体 分泌 血浆 成活 联合 | ||
【主权项】：
1.一种自体成纤维细胞培养方法，其特征在于依次进行皮肤标本处理步骤、酶消化法获得成纤维细胞步骤及成纤维细胞培养步骤：所述皮肤标本处理步骤包括：在无菌条件下从耳后取皮或眼睑处取皮；所述酶消化法获得成纤维细胞步骤包括：在超净工作台无菌环境下，去除选取的皮肤标本的皮下组织及血管后，先加入0.25%～0.5%胰蛋白酶及0.2～0.4% EDTA进行皮肤标本的消化，再加入1～5mg/mL I型胶原蛋白酶进行消化，获得成纤维细胞；所述成纤维细胞培养步骤包括：在DMEM/F12培养基中加入细胞生长因子KGF、PDGF及富含血小板的血浆，在35～37℃、浓度1～5%二氧化碳培养箱中培养成纤维细胞，所述细胞生长因子的浓度为：KGF活力单位为50～200U/mL，PDGF活力单位为100～500U/mL，所述富含血小板的血浆，是自体全血经离心后得到的血小板浓缩物，将其加入DMEM/F12培养基中，其血浆最终浓度为5～20%。
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