[发明专利]自体成纤维细胞培养方法

说明书

本发明提供一种自体成纤维细胞培养方法，其特征在于依次进行皮肤标本处理步骤、酶消化法获得成纤维细胞步骤及成纤维细胞培养步骤，本发明采用获取自体皮肤来源的成纤维细胞，使用基础培养基联合自体外周血来源的富含血小板的血浆及相关的细胞生长因子，进行成纤维细胞的扩增，使用时，回输的成纤维细胞来源于自体，安全性非常高，不会出现排异反应，回输后易于成活，能迅速分泌胶原蛋白，由于机体代谢功能的调节作用，并不会出现胶原蛋白过度增生的现象，因此除皱的效果十分自然。

技术领域

本发明涉及一种成纤维细胞的体外增殖方法，以及应用该细胞进行皮肤皱纹祛除的自体成纤维细胞培养方法。

背景技术

在“颜值”当道的时下，消费者对医疗美容需求大幅增长，一场由“颜值”引发的革命席卷全球，“颜值经济”持续升温。数据显示，全球“颜值经济”规模超过3万亿元。其中，中国医美市场已突破5000亿元，位列全球第三，预计两年后也就是2019年规模将达到1万亿元。

目前医美行业的突出矛盾已经转换为：消费者期望更安全、更高效的生物产品与现有的安全性一般、疗效一般的化学产品之间的矛盾，社会的进步与生活水平的提高，使消费者越来越注重生活质量的改善。皮肤作为人体最大的器官，其结构完整、美观不仅影响着心情，也体现其生活质量的高低。因此，越来越多的爱美人士渴望通过医疗技术干预皮肤老化。

皮肤从表面开始依次为表皮、真皮、皮下组织，研究表明，对人体肌肤起支撑作用的物质大部分存在于真皮层，由胶原蛋白、弹性纤维和透明质酸构成的一个纤维网络对皮肤起着支撑作用，其含量的多少决定了皮肤的质地。真皮层中的成纤维细胞不断分泌胶原蛋白、弹性纤维和透明质酸，保持肌肤的光泽度和质感。随着年龄的增长，成纤维细胞不断衰减，进而导致胶原蛋白、弹性纤维和透明质酸的数量均下降，使皮肤出现皱纹，由此可见成纤维细胞的减少才是肌肤衰老的真正原因。

成纤维细胞减少导致的肌肤衰老，最主要的是因为胶原蛋白的含量降低。胶原蛋白是一种纤维状蛋白质，存在于皮肤、血管、肌腱、牙齿等大多数细胞中，占构成人体总蛋白的30%左右。人体由60兆个以上的细胞构成，细胞和细胞所构成的脏器，是靠细胞外基质的连接作用形成的。胶原是构成细胞外基质的一种蛋白质，作为细胞存在的场所，有助于其增殖和功能的维持。胶原蛋白含量的降低和成纤维细胞的功能降低是产生皱纹、松弛等老化现象的主要因素。

美容医学发展趋势朝着简单、微创、安全的方向发展，面部老化的治疗也从过去的手术治疗向生物制剂注射治疗转化。当前主要的生物制剂有胶原蛋白、透明质酸酶和肉毒素等。胶原蛋白和透明质酸酶是真皮组织细胞外基质的主要成分。注射这两种生物制剂可使老化皮肤逐渐减少的真皮厚度与细胞外基质得到补充，具有除皱效果明显，起效快的特点；但这些成分多数是异体或异种成分，存在免疫排斥和过敏反应的可能，且生物代谢作用使之很快降解，效果持续时间短暂是这类产品的主要缺点。肉毒素制剂可用于面部皱纹的改善；其缺点与前两者相同。上述产品的短期效果明显，但长期效果及安全性却一直备受质疑。

人体皮肤的弹性与光泽由真皮组织中成纤维细胞的数量决定，随着年龄的增长皮肤组织内的成纤维细胞逐渐减少。在皮肤组织中补充成纤维细胞可持续地增加成纤维细胞的数量，促进胶原蛋白的增生，使真皮组织的厚度增加，恢复皮肤的弹性，从而消除皮肤的皱纹或使凹陷的疤痕得到填充。

自体细胞除皱适应症广泛，不但可用于所有的皮肤皱纹的去除，而且可用于凹陷性疤痕的治疗。对于颈纹、手部皱纹、额头纹、眉间纹、鱼尾纹、口周和面部皱纹、妊娠纹以及痤疮、青春痘、天花、水痘、外伤等在面部留下的凹陷性疤痕都有明显的效果。

由于细胞取自自体，较以往的除皱手段有着截然相反的医学思路，它不是刺激肌肤病理性改变来除皱，也不是异物物理性填充来除皱。而是通过直接增强皮肤功能来达到治疗目的，因而属于生理性除皱。自体细胞非手术除皱除了可以令患者保持更久的青春外，更重要的是它的安全性。